人IL-12重组逆转录病毒载体在HeLa细胞中的表达  

Construction of recombinant retroviral vector carrying IL-12 gene and identification of its expression in HeLa cells

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作  者:张巨峰[1,2] 陈艳娜[1] 张文峰[1] 王俊伟[1] 牟艳芳[1] 黄树林[1] 

机构地区:[1]广东药学院生命科学与生物制药学院,广东广州510006 [2]深圳北京大学香港科技大学医学中心生物医学研究所,广东深圳518036

出  处:《现代生物医学进展》2010年第7期1205-1207,共3页Progress in Modern Biomedicine

基  金:中国博士后科学基金(20080440778);广东药学院博士启动基金(43555023)

摘  要:目的:包装携带人白细胞介素12(IL-12)的逆转录病毒,用于宫颈癌的治疗研究。方法:携带IL-12的逆转录病毒重组质粒pL35P40SN经PA317细胞包装,G418筛选,在NIH3T3细胞进行病毒滴度测定。然后用病毒感染人宫颈癌细胞HeLa。PCR、RT-PCR方法检测IL-12基因在HeLa中的整合和表达情况。结果:重组质粒pL35P40SN经PA317细胞包装后收获病毒上清,感染HeLa细胞,检测发现IL-12基因整合到细胞基因组DNA中,并且能有效的转录。结论:成功包装了携带IL-12基因的逆转录病毒,该病毒能有效感染HeLa细胞,并使携带的基因IL-12在细胞中表达,为今后IL-12基因治疗宫颈癌的研究奠定基础。Objective:To package the recombinant retrovirus carrying interleukin 12(IL-12) gene and to observe the expression of IL-12 in cervical carcinoma cell line HeLa.Methods:The retroviral vector pL35P40SN was transferred into retroviral producer cell line PA317 for packaging retrovirus and then the resultant retrovirus was applied to infect the HeLa cells.The integration of IL-12 gene into the HeLa cells genome was assayed by PCR.The expression of IL-12 gene was detected by RT-PCR.Results:The IL-12 gene was integrated into the genome of HeLa cells shown by results of PCR after retroviral infection.The expression of IL-12 gene was confirmed by RT-PCR.Conclusion:The recombinant retrovirus carrying IL-12 gene was packaged successfully and may be a potentially effective strategy for the treatment of cervical cancer.

关 键 词:IL-12基因 逆转录病毒 宫颈癌 

分 类 号:R737.33[医药卫生—肿瘤] Q75[医药卫生—临床医学]

 

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