用Far-Western印迹技术筛选人肝组织中与乙肝病毒表面抗原PreS1相互作用的蛋白  

Identification of Proteins Interacting with the Hepatitis B Virus Surface Antigen PreS1 in Human Liver by Far-Western Blot

作　　者：苏婧[1,2] 杨静[2] 张松[2] 丁晓然[2] 王学军[2] 胡伟[2] 朱向前[2] 张敏丽[2] 王升启[2] 

机构地区：[1]华南师范大学生命科学学院,广东广州510631 [2]军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京100850

出　　处：《生物技术通讯》2010年第3期355-358,共4页Letters in Biotechnology

基　　金：国家自然科学基金重点项目(30530650);国家自然科学基金面上项目(30600531);国家自然科学基金杰出青年基金(30625041);国家重点基础研究发展计划(2005CB522902);国家传染病防治科技重大专项(2008zx1002-011)

摘　　要：目的:利用Far-Western印迹技术从正常人肝组织中筛选乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原PreS1结合蛋白,为阐明HBV的感染致病机理提供依据。方法:提取正常人肝组织细胞膜蛋白,双向电泳展示后转膜,对表达纯化获得的PreS1的重要片段与GST的融合蛋白PreS/1-48myr-GST进行Far-Western印迹实验,对筛选获得的蛋白点切胶,质谱鉴定。结果:对PreS/1-48myr-GST融合蛋白进行Far-Western-2D筛选,共获得22个蛋白点,经质谱鉴定获得15个候选相互作用蛋白,其中膜蛋白Ezrin可能在HBV感染致病过程中具有重要作用。结论:Ezrin蛋白能够与乙肝病毒表面抗原PreS1结合,其在HBV感染致病过程中的重要作用值得探索。Objective：To provide a basis for the hepatitis B virus（HBV） infection pathogenesis by screening HBV surface antigen（HBsAg） PreS1-interacting proteins in human liver.Methods：Membrane protein of normal human liver tissue was analyzed by two-dimensional gel electrophoresis and Far-Western blot using an N-terminally myristoylated peptide（HBV PreS / 1-48myr） and anti-GST monoclonal antibody.Several proteins were identified using mass spectrum.Results：Fifteen proteins as candidates were presented by mass spectrum,and we considered that PreS1 binds to membrane protein named Ezrin.Conclusion：It is possible that Ezrin plays an important role in the process of HBV infection.The physiological function of PreS1 binding to Ezrin needs to be further studied.

关 键 词：乙型肝炎病毒表面抗原 PRES1 结合蛋白 EZRIN Far-Western印迹 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学] Q503