siRNA干扰立早蛋白ICP4对HSV-1病毒复制能力的影响  

作　　者：刘玉涛[1,2] 王喜[3] 宋波[2] 许予明[2] 韩志强[2] 赵莘瑜[2] 贾丽洁[2] 王亚仑[2] 

机构地区：[1]河南大学淮河医院,开封475000 [2]郑州大学第一附属医院 [3]河南大学环境与规划学院

出　　处：《山东医药》2010年第19期76-78,共3页Shandong Medical Journal

基　　金：河南省教育厅河南省基础与前沿技术研究计划项目(082300450270);河南省教育厅河南省基础与前沿技术研究计划项目(082300450610);河南省教育厅自然科学研究计划项目(2009A320045)

摘　　要：目的观察siRNA作用于HSV-1病毒的ICP4后对HSV-1复制能力的影响。方法设计两段靶向HSV-1 ICP4的siRNA和一段阴性对照序列,酶切连接法构建重组质粒pLKO-puror-hU6-siRNA/CON;脂质体法包装重组慢病毒pLKO-puror-hU6-siRNA/CON;嘌呤霉素筛选法建立抗ICP4的siRNA单克隆细胞系(VERO115、VERO3604、VERO115+3604、VERO-CON);TCID50法检测siRNA对HSV-1的病毒复制能力的影响。结果成功构建重组质粒pLKO-puror-hU6-siRNA/CON;获得重组慢病毒pLKO-puror-hU6-siRNA/CON;成功构建四个抗ICP4的siRNA单克隆细胞系;BAC-HSV-1-GFP病毒感染单克隆细胞系,siRNA作用后野生型VERO细胞的细胞病变效应(CPE)及绿色荧光蛋白(GFP)表达率均近100%,VERO-CON细胞达90%以上。siRNAVERO115及VERO3604的CPE及GFP表达率明显高于VERO115+3604细胞,P<0.05。且不同位点联合干扰对病毒的抑制作用强于单一位点干扰,低于VERO115和VERO3604,P<0.05。结论抗ICP4的siRNA对HSV-1的复制有明显的抑制作用,且不同位点siRNA联合干扰对病毒的复制有协同抑制效果。

关 键 词：RNA 小分子干扰 ICP4 疱疹病毒1型 人 病毒复制 

分 类 号：R737.9[医药卫生—肿瘤]