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作 者:陈显久[1,2] 刘玮玮[2] 解军[2] 史培荣[1] 程牛亮[2] 郝梅[3] 张并生[1] 牛勃[2]
机构地区:[1]山西医科大学口腔医学系基础医学教研室,太原030001 [2]山西医科大学生物化学与分子生物学教研室,太原030001 [3]山西省人民医院口腔内科
出 处:《中华口腔医学研究杂志(电子版)》2010年第4期13-19,共7页Chinese Journal of Stomatological Research(Electronic Edition)
基 金:太原市技术创新计划项目(0701026)
摘 要:目的研究与口腔鳞状细胞癌(OSCC)发生相关的表达阳性基因,为探究OSCC的发生机制奠定基础。方法采用美国SuperArray公司的肿瘤基因芯片(OHS-802)检测口腔正常组织和OSCC组织的肿瘤相关基因表达差异,进一步使用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法对部分阳性基因进行验证,寻找与OSCC恶变发生、发展相关的基因。基因芯片实验采用化学发光检测试剂盒,X线胶片曝光,图片需保存为灰度(8或16位色)的电子文档,使用综合型GEArray表达分析配套软件进行完整的芯片数据分析。RT-PCR电泳结果采用Kodak凝胶成像分析系统对部分基因的表达水平进行定量,然后将其与芯片分析的数据结果进行相似性分析。结果经Kodak凝胶成像分析系统定量后,证实正常组织和OSCC组织间CLK-3、CTNNB-1、GDF-15、FKBP-8、SOCS-3、NF-1、BCL-2、XRCC-1、ACP-2共9个SupperArray阳性基因的RT-PCR结果,在表达水平上和SupperArray芯片检测方法获得的结果差异有统计学意义(P<0.05)。OSCC发生的分子机制较为复杂,特别是与细胞周期调控基因、生长因子基因和细胞增殖分化基因关系密切。结论本研究为深入了解OSCC的发生机制奠定了基础。Objective To screen the marker genes related to the tumorigenesis of oral squamous cell carcinoma (OSCC),and to explore the possible mechanism of OSCC.Methods In order to identify candidate genes,differential gene expression profile between normal tissues and OSCC tissues was examined by using Oligo Cancer Microarray (SuperArray,U.S.A) and further validate by RT-PCR.to identify the genes related to OSCC.Total RNAs were isolated from tissue samples,Chemiluminescent Detection Kit (SuperArray Bioscience,Catalog Number D01),X-ray film and GEArray Expression Analysis Suite (supplies on Internet) were performed to analyze the gene profile of OSCC.In order to quantize the expression level of the chosen genes in RT-PCR,Kodak Gel image analysis system was used.A correlation analysis was then performed.Results The microarray analysis revealed nine differentiated expressed genes including CLK-3,CTNNB-1,GDF-15,FKBP-8,SOCS-3,NF-1,BCL-2,XRCC-1 and ACP-2 (P 0.05),which were further confirmed by RT-PCR results (P 0.05).Conclusion This research may shred light on the underlying molecular mechanism of OSCC.
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