CS3菌毛抗原和霍乱毒素B亚基在人伤寒菌中的表达  

Simultneous Expression of CS3 Colonization Factor Antigen and Cholera Toxin B Subunit in Salmonella typhi

作　　者：韩照中[1] 芮贤良[1] 曹勇[1] 应天翼[1] 苏国富[1] 张兆山[1] 黄翠芬[1] 

机构地区：[1]北京生物工程研究所,北京100071

出　　处：《生物化学与生物物理学报》1999年第4期367-372,共6页

摘　　要：通过体内外重组的方法， 构建了人伤寒菌流行株Ｔｙ２ 的ΔａｒｏＡ、ΔａｒｏＣ 和ａｓｄ－ 基因缺失突变体（ＲＳ４１７）， 作为抗原载体菌； 同时， 构建包含ａｓｄ 基因的表达质粒ｐＹＸ１０２ ， 与ＲＳ４１７ 一起， 构成宿主载体平衡致死系统， 用于在没有抗生素条件选择的情况下， 稳定表达克隆在表达质粒上的外源抗原基因。将肠毒素性大肠杆菌的菌毛抗原ＩＩＩ（ＣＳ３） 基因和霍乱弧菌毒素Ｂ亚基（ＣＴＢ） 基因分别克隆至ｐＹＸ１０２ ， 构建成相应的重组表达质粒，ＥＬＩＳＡ 检测结果证实菌毛抗原ＩＩＩ和霍乱弧菌毒素Ｂ亚基在人伤寒菌ＲＳ４１７ 中可以分别表达和共表达。重组菌免疫小鼠后可诱生相应的血清抗体， 虽然口服免疫和注射免疫产生的ＣＳ３ 和ＣＴＢ抗体效价有一定差别， 但皮下免疫组对人伤寒菌流行株Ｔｙ２ 的攻击可提供完全保护。研究结果对细菌性腹泻疫苗的研制有参考价值。A host plasmid balancing system was established based on asd gene in an avirulent strain of Salmonella typhi to express enterotoxigenic E.coli surface antigen CS3 and V.cholerae toxin subunit B(CTB). The plasmid can be stably maintained in the host and can express CS3 and CTB in the host cell without any antibiotic selection, although expression level and growth characteristics of the recombinant strain expressing either CS3 or CTB are superior to that of the recombinant strain which expresses both of the antigens. Antibo dies against CS3 and CTB can be detected in sera of mice immunized with recombinant bacteria either orally or subcutaneously, and mice immunized subcutaneously can be protected from challenging with virulent strain of Salmonella typhi. This work may be helpful in constructing multivalent recombinant vaccines for prevention of bacterial diarrhea.

关 键 词：疫苗 菌毛抗原 霍乱弧菌素 人伤寒菌 细菌性腹泻 

分 类 号：R516.501[医药卫生—内科学] R378.23[医药卫生—临床医学]