牛β-酪蛋白座位无启动子基因打靶载体的构建  

Non-Promotor Gene Targeting Vector Construction for Bovine β-casein Site

作　　者：李瑞国[1] 苗朝华[2] 侯健[3] 关宏[3] 安晓荣[3] 陈永福[3] 

机构地区：[1]中国生物技术发展中心,北京100036 [2]中国农业科学院生物技术研究所,北京100081 [3]中国农业大学农业生物技术国家重点实验室,北京100094

出　　处：《华北农学报》2010年第4期17-24,共8页Acta Agriculturae Boreali-Sinica

基　　金：国家"863"计划项目(2002AA206311);国家自然科学基金项目(30871783;30700573)

摘　　要：将带有新霉素基因(neo)和绿色荧光蛋白基因(GFP)的质粒pEGFP-C1进行了改造,去掉neo基因的启动子(Psv40),在无启动子的neo和完整的GFP基因两侧分别加入一个LoxP位点。然后将带有LoxP位点、筛选标记基因和报告基因的结构装入左右分别为牛β-casein基因1590bp和5833bp的同源臂结构中,构建成无启动子基因打靶载体pT-1590-LoxP-GFP-LoxP-5833。Plasmid vector pEGFP-C1,including neo and GFP gene,was modified. Psv40 promoter for neo was deleted,and introduce a LoxP locus into each flank of non-promoter neo and complete GFP,constructed pEGFP-LoxP. Then we introduced 1 590 bp and 5 833 bp sequences from bovine genomes into vector pEGFP-LoxP,completed construction of non-promoter gene targeting vector,which is pT-1590-LoxP-GFP-LoxP-5833,to bovine β-casein gene locus.

关 键 词：牛β酪蛋白 LOXP 无启动子 打靶载体 构建 

分 类 号：Q785[生物学—分子生物学]