打靶载体

作品数：61被引量：88H指数：4
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p53^(V149F)突变打靶载体及细胞模型的构建
《云南农业大学学报（自然科学版）》2024年第3期64-71,共8页曹攀 蔡洁 张晓银 熊喆 角德灵 赵恒 徐凯祥 赵红业 
云南省重大科技专项计划项目(202102AA100054)。
[目的]构建p53基因突变模型,为研究p53基因突变引发肿瘤的发生和进展提供细胞模型资源。[方法]利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,根据p53^(V149F)突变位点的序列,在线设计合成单链向导sgRNA,构建CRISPR打靶载体;将重组载体转染细胞,流式分...
关键词：基因编辑 打靶载体 癌症 P53基因 
小鼠TDO2基因条件性敲除打靶载体的构建被引量：1
《安徽医科大学学报》2023年第7期1082-1086,共5页许媛 魏伟 常艳 
安徽省自然科学基金资助项目(编号:2108085MH320);安徽省高校协同创新项目(编号:GXXT-2020-065)。
目的构建小鼠TDO2基因条件性敲除打靶载体,为建立TDO2基因条件性敲除小鼠奠定基础。方法根据CRISPR/Cas9技术原理,设计并构建单链向导RNA(sgRNA)和Donor载体,以TDO2-201(ENSMUST00000029645.13)转录本的外显子3作为敲除区,在打靶基因两...
关键词：TDO2 基因敲除 CRISPR/Cas9 打靶载体 
携带FAT1-FAT2基因打靶载体构建及其在猪肾细胞的表达与功能鉴定
《广东农业科学》2021年第8期116-123,共8页林纯 汤飞 李紫聪 
【目的】ω-3多不饱和脂肪酸(PUFAs)对人类具有重要的营养价值与医疗作用。随着生物技术的发展,通过转基因技术可实现哺乳动物体内自身合成多不饱和脂肪酸,进而改变猪肉中不饱和脂肪酸的含量和种类,对人类的营养健康具有积极意义。【方...
关键词：不饱和脂肪酸 FAT1-FAT2基因 打靶载体 脂肪酸 
大肠杆菌Targetron基因打靶载体构建及应用
《贵州医科大学学报》2019年第7期745-750,共6页黄瑾 陈相好 吴晓娟 张峥嵘 谷俊莹 陈峥宏 崔古贞 
国家自然科学基金(31760318,31500078,31560318,31601012);贵州省科技计划项目[黔科合基础(2018)1132];贵州省研究生科研基金立项项目(11348)
目的:构建基于细菌Ⅱ型内含子的Targetron基因打靶载体,并在大肠杆菌中验证其功能。方法:以构建的pSY7载体为基础、以大肠杆菌lacZ基因为例,选择lacZ-1683a和lacZ-1874s位点为靶位点,利用在线设计软件设计打靶引物,通过重叠延伸PCR方法...
关键词：Ⅱ型内含子 打靶载体 大肠杆菌 重叠延伸PCR Targetron基因 
PGRN和Rev-erbβ双基因敲除HEK 293细胞系的构建及应用
《生物工程学报》2018年第10期1679-1692,共14页陈芳 杨沛艳 朱久玲 
国家自然科学基金(No.81471772);安康市科技局科学技术研究项目(No.2017AK02-17);安康学院高层次人才专项(No.2017AYQDZR05)资助~~
为研究PGRN与Rev-erbβ相互作用可能存在的分子机理及其生理意义,在前期构建的Rev-erbβ基因敲除HEK293 C3-6细胞系的基础上,利用CRISPR/Cas9技术构建PGRN和Rev-erbβ双基因敲除的HEK293细胞系。首先,针对PGRN基因设计了4个不同的sgRNA...
关键词：PGRN Rev-erbβ CRISPR/Cas9 双基因敲除 慢病毒打靶载体 
小鼠T279基因敲除胚胎干细胞的构建被引量：1
《郑州大学学报（医学版）》2018年第4期448-452,共5页杨超 王朝亮 张天标 殷正伟 王瑞 
目的:利用打靶载体技术构建小鼠T279基因敲除胚胎干细胞模型。方法:订购含小鼠T279基因的129BAC质粒和PL452,PCR扩增Retrieving同源臂及loxp-neo-loxp片段,利用PL253质粒进行目的片段的连接,并在EL350大肠杆菌中进行同源重组,构建T279...
关键词：T279 基因敲除 打靶载体 同源重组 小鼠 
小鼠TSC21基因敲除打靶载体的构建和胚胎干细胞同源重组克隆的鉴定被引量：1
《郑州大学学报（医学版）》2018年第4期511-515,共5页殷正伟 王朝亮 张天标 杨超 张卫星 
目的:构建小鼠TSC21基因敲除打靶载体,电转胚胎干细胞(ES细胞)并筛选同源重组阳性克隆。方法:订购含TSC21基因的129 BAC克隆,PCR扩增2对同源臂,利用PL253、PL452质粒进行目的片段的连接和同源重组,构建打靶载体并电转ES细胞,利用Souther...
关键词：TSC21 基因敲除 打靶载体 同源重组 小鼠 
携带博来霉素抗性筛选标记的多位点基因打靶载体构建
《中文科技期刊数据库(引文版)医药卫生》2016年第3期00258-00259,261,共3页严爱芬 罗婷婷 杨倩桂 刘芳 唐冬生 
构建携带新霉素抗性筛选标记的人类多位点基因打靶载体。方法:本研究利用高保真酶对sv40 promoter-zeocin ORF-sv40 polyA进行PCR扩增,以构建好的含有左右同源臂DS1和DS2的打靶载体pUC-DS1-DS2为骨架载体(靶向人核糖体基因)。用Xba I对...
关键词：同源重组克隆 基因打靶 多位点打靶载体 
人工转录激活子样效应因子核酸酶与多位点基因打靶载体的构建与鉴定被引量：3
《中华生物医学工程杂志》2015年第5期400-406,共7页刘婉霞 严爱芬 刘芳 蒋泓 冯翠兰 刘靖 唐冬生 张雅洁 
国家自然科学基金（81272552）;国家科技重大专项（2014ZX0801012B）;广东高校优秀青年创新人才培养计划项目（2013LYM1_0098）
目的构建并验证针对人类基因组核糖体DNA（rDNA）序列的转录激活子样效应因子核酸酶（TALEN）表达载体与人类通用多位点基因打靶载体。方法运用在线软件TALENs Targeter在rDNA序列上设计TALEN切割位点，并构建针对该位点的TALEN表达载...
关键词：转录激活子样效应因子核酸酶 基因打靶 核糖体DNA 
基础型无启动子基因打靶载体pMCS-IEN的构建及初步检测被引量：1
《农业生物技术学报》2015年第7期973-980,共8页梁浩 刘慧 韩雪洁 赵宇航 塔娜 云亭 刘东军 旭日干 李荣凤 李雪玲 
国家转基因生物新品种培育重大专项(No.2013ZX08008-002);国家高技术研究发展计划(863计划)项目(No.2009AA10Z111)
基因打靶是一项以DNA同源重组为基础,在基因水平上进行定向可遗传性修饰的新型分子生物学技术。无启动子基因打靶技术的建立,对于提高基因定点整合效率以及外源基因的正确表达非常重要。本实验通过PCR技术对p IRES2-EGFP中的neor基因片...
关键词：基因打靶 无启动子基因打靶载体 融合蛋白 转染 绿色荧光蛋白 
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