外源性核仁素转基因小鼠的构建与鉴定  

作　　者：周斌[1] 蒋碧梅[1] 

机构地区：[1]中南大学湘雅医学院病理生理学教研室,湖南省长沙市410078

出　　处：《中国动脉硬化杂志》2010年第9期676-676,共1页Chinese Journal of Arteriosclerosis

基　　金：国家自然科学基金(30700290)资助

摘　　要：目的最近研究表明核仁素(nucleolin,Ncl)蛋白作为一种内源性保护蛋白,在心肌细胞受损过程中发挥了重要的内源性保护作用。以往对核仁素发挥心肌保护作用的机制研究常局限于细胞水平。本研究构建并鉴定了携带有外源核仁素基因的转基因小鼠,为从整体水平上研究核仁素对心肌功能的影响,发挥心肌保护作用的机制提供动物模型。方法采用基因重组法将小鼠核仁素(Ncl)基因的全长cDNA置于α-肌球蛋白重链(α-MHC)启动子下游构建成α-MHC-Ncl重组载体,通过双酶切及基因测序鉴定其正确性;通过原核显微注射将该载体导入小鼠受精卵原核中,经注射且状态良好的受精卵回输至假孕雌鼠输卵管中,剪取0.5 cm仔鼠的鼠尾,收集DNA,进行PCR鉴定。结果双酶切及基因测序显示成功构建了α-MHC-Ncl重组质粒,将其显微注射到小鼠受精卵中,得到G0代小鼠106只,PCR确定了5只整合有Ncl基因的首建鼠。结论核仁素基因可以整合到小鼠体内,得到的转基因小鼠可能成为有效的动物模型,用于研究核仁素在心肌保护方面发挥的生物学作用。

关 键 词：核仁素 转基因 心肌细胞 小鼠 

分 类 号：R363[医药卫生—病理学]