人型结核杆菌克隆DNA探针的制备及其应用的研究  

THE PREPARATION AND APPLICATION OF M. TUBERCULOSIS CLONALDNA PROBES

作　　者：吴雪琼[1,2] 庄玉辉[1,2] 黄蓉蓉 黄培堂[1,2] 李丰生[1,2] 

机构地区：[1]解放军三0九医院结核病研究室 [2]军事医学科学院分子遗传学中心

出　　处：《中国现代医学杂志》1999年第4期3-5,8,共4页China Journal of Modern Medicine

摘　　要：用限制性内切酶ＰｓｔⅠ消化人型结核杆菌Ｈ３７ＲｖＤＮＡ，与质粒ｐＵＣ１９ＤＮＡ连接后转化大肠杆菌，经同位素３２Ｐ标记的人型结核杆菌Ｈ３７Ｒｖ全染色体ＤＮＡ探针筛选出６个阳性克隆（ＭＴ１～６），其中克隆ＤＮＡ片段ＭＴ２（４．２Ｋｂ）、ＭＴ４（３．５Ｋｂ）和ＭＴ５（３．０Ｋｂ）标记成探针，检测了２２种分支杆菌标准株和１５株人型结核杆菌临床分离株以及２种非分支杆菌，其杂交结果完全相同，与人型结核杆菌及其临床分离株杂交阳性，与牛型结核杆菌、卡介苗、堪萨斯分支杆菌、鸟分支杆菌、胃分支杆菌、龟分支杆菌和戈登分支杆菌ＤＮＡ有交叉杂交，与其它１２种分支杆菌以及大肠杆菌、星状诺卡氏菌不杂交。克隆ＤＮＡ探针可能成为分支杆菌分类、鉴定的一种新工具。Objective:M. tuberculosis clonal DNA probes were prepared in order to establish a new method of the taxonomy and identification of mycobacteria on the level of gene.Three clonal fragments (Mt 24.2Kb,MT 43.5Kb,MT 53.0Kb) were radiolabelled by the probes.Their hybridizing results were quite similar:they all hybridized strongly with DNA from M.tuberculosis,cross-hybridized with DNA from M.bovis,M.bovis BCG,M.kansasii,M.avium,M.gastri,M.chelonei and M.gorconae,and did not hybridize with DNA from other 12 mycobacteria tested,E.coli and Nocardia asteroids.Therefore,the clonal DNA probe may become a useful tool for the identification of species.

关 键 词：结核杆菌 克降 DNA探针 制备 应用 

分 类 号：R372[医药卫生—病原生物学] R378.91[医药卫生—基础医学]