HER-2基因打靶对HeLa细胞生长的抑制  

作　　者：王向东[1] 汪维 任庆虎[1] 陈培利[1] 姜琨[1] 童坦君[1] 高建刚[2] 

机构地区：[1]北京医科大学生物化学与分子生物学系,北京100083 [2]中国科学院发育生物研究所,北京100080

出　　处：《自然科学进展（国家重点实验室通讯）》1999年第8期703-709,共7页

基　　金：国家自然科学基金(批准号:39670806)

摘　　要：构建具有正、负筛选特性的HER-2基因打靶载体,promoter pPNT 1305。用电穿孔法把线性promoter pPNT 1305导入HeLa细胞,经G418正筛选及丙氧鸟苷负筛选,选出敲除了HER-2单等位基因的打靶命中细胞(HER-2^(-1)细胞)。Northern杂交表明,HER-2^(-1)细胞的HER-2 mRNA水平低于HeLa细胞;Western blot结果显示其HER-2蛋白水平下降,亦低于HeLa细胞。流式细胞计分析表明,HER-2单等位基因敲除后,细胞周期时相左移,G1期比例上升,G2+M期比例下降。可见敲除HER-2基因对HeLa细胞生长具有抑制作用。

关 键 词：基因打靶 原癌基因 HELA细胞 HER-2 细胞增殖 

分 类 号：R73－36[医药卫生—肿瘤]