sCD14在内毒素诱导巨噬细胞活化中的调节机制  

Regulatory role of sCD14 in macrophage activation and cytokines secretion stimulated by LPS

作　　者：舒旷怡[1] 杨锦红[1] 任凭[2] 杨爱平[2] 余玲玲[1] 李向阳[1] 

机构地区：[1]温州医学院附属第二医院检验科,325027 [2]温州医学院

出　　处：《浙江医学》2010年第12期1747-1749,1772,共4页Zhejiang Medical Journal

基　　金：基金项目：浙江省自然科学基金资助项目（Y2080596）;温州市科技计划基金资助项目（Y20100094）

摘　　要：目的 观察不同浓度的sCD14和脂多糖（LPS）经过孵育和不孵育同时刺激佛波醇酯（PMA）诱导分化的THP-1细胞分泌肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,以研究sCD14在LPS转运和活化过程中的重要调节作用.方法 通过细胞培养,实验细胞为PMA诱导分化的THP-1细胞;同时将实验分为sCD14组（终浓度分别为1、0.5、0.1、0.01μg/ml）、sCD14～LPS混合物预孵育组（LPS终浓度分别为10、1ng/ml;sCD14终浓度为分别1、0.5、0.1、0.01μg/m1）、sCD14-LPS不孵育组（LPS终浓度分别为10、1ng/ml;sCD14终浓度为1、0.5、0.1、0.01μg/ml）,并分别培养4h后,吸出上清液至1.5ml的离心管中,于-70℃内保存并采用化学发光法检测TNF-α.结果 sCD14本身不能刺激单核细胞分泌TNF-α;LPS浓度为1ng/ml、sCD14浓度为0.01μg/ml和0.1μg/ml时,与LPS单独刺激TNF-α分泌量的差异均无统计学意义（均P＞0.05）;sCD14浓度为0.5μg/ml和1μg/ml时,TNF-α分泌量的差异均有统计学意义（P＜0.05或0.01）.在LPS浓度为10ng/ml、sCD14浓度为0.5μg/ml和1μg/ml时,与LPS单独作用TNF-α分泌量均有显著性差异（均P＜0.01）.sCD14/LPS混合物预孵育组曲线低平,无明显分泌高峰.结论 适当浓度的sCD14可明显增强LPS对单核巨噬细胞的活化作用,且在LPS高浓度时尤为明显,而将sCD14和LPS混合孵育可使上述效应减少甚至消失.Objective To investigate the regulatory role of sCD14 in macrophage activation and cytokine secretion stimulated by lipopolysaccharide （LPS）.Methods THP-1 cells were differentiated by PMA, and divided into three groups： sCD14 group （final concentration： 1, 0.5, 0. 1 and 0.01 μ g/mL）, sCD14/LPS pre-incubation group （LPS fina） concentration： 10 and lng/mL; sCD14 final concentration： 1, 0.5, 0.1 and 0.01μg/mL）, sCD14/LPS without preincubation （final concentration of LPS and sCD14 were as above）. The cells were cultured for 4h and the TNF- αlevels in supernatant were measured.Results sCD14 did not stimulate mononucle cells to secrete TNF-α. Low concentration sCD14 （0.01 and 0.1 μ g/mL） did not increase TNF-α secretion when cells were stimulate by lng/mL LPS（P 〉0.05）. High concentration sCD14 （0.5 and 1 μg/mL） increased TNF- α secretion（P 〈0.05）; the effect was more prominent when LPS concentration was 10ng/mL （P 〈0.01 ）. Conclusion sCD14 can significantly enhance LPS activation on monocyte-macrophage.

关 键 词：脂多糖肿瘤坏死因子-α 细胞培养可溶性CD14 

分 类 号：R512.620.6[医药卫生—内科学]