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作 者:郭仁锋[1] 孙蕾[2] 程云[1] 李静[1] 曹阳[1] 罗清华[1] 赵军[1] 李伯安[1] 薛净[1]
机构地区:[1]解放军302医院传染病研究所免疫室,北京100039 [2]军事医学科学院基础医学研究所
出 处:《细胞与分子免疫学杂志》1999年第4期259-262,共4页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology
摘 要:将乙肝病毒表面抗原(HBsAg) 主蛋白的编码基因S与人GMCSF 基因融合后, 插入真核表达质粒pcDNA1 中, 经质粒酶切鉴定及DNA 序列分析证明, 目的基因(1. 1kb) 插入pcDNA1 的CMV 启动子下游。以获得的重组质粒pSGM 转染L929 细胞, 经RTPCR 及细胞原位杂交证实了目的基因的转录。通过免疫组化技术, 利用抗HBs 和GMCSF抗体, 检出目的基因在L929 细胞中的表达。该结果为用乙型肝炎病毒的基因免疫打下了基础。HBV S gene encoding major envelope protein was fused with human GM CSF gene and inserted into eukaryotic expression plasmid pcDNA1. Enzyme digestion and DNA sequencing analysis showed that the 1.1 Kb target gene was inserted into downstream of the CMV promoter. Then the recombinant plasmid pSGM was transfected into L929 cells. The gene transcription was confirmed by RT PCR and cell in situ hybridization and the gene products was demonstrated by immunohistochemical staining with anti HBs and anti GM CSF antibody. Above results lay the foundation for the gene immunization of HBV.
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