鞘鞍醇激酶1对肝癌细胞凋亡特性的影响  

Effect of sphingosine kinase on the apoptosis of human hepatocellular carcinoma cell

作　　者：陈海英[1,2] 高艳景[1] 刘慧亚[1] 陈雨信[3] 姜大磊[4] 袁勇[5] 

机构地区：[1]山东大学齐鲁医院消化内科,山东济南250012 [2]教育部和卫生部心血管重构和功能研究重点实验室,山东济南250012 [3]山东大学齐鲁医院肝胆外科,山东济南250012 [4]青岛市立医院消化内科,山东青岛260000 [5]青岛大学医学院附属医院医政部,山东青岛266000

出　　处：《中国现代普通外科进展》2011年第1期6-8,16,共4页Chinese Journal of Current Advances in General Surgery

基　　金：山东省自然科学基金资助课题(Y2006C53)

摘　　要：目的:研究鞘鞍醇激酶1(SPK1)对人肝癌耐药细胞株BEL-FU凋亡特性的影响。方法:扩增并纯化携带野生型(Ad-SPK1WT)和SiRNASPK1(Ad-H1-SPK1)的重组腺病毒,以TCID50方法(I-U/ml)和快速CPE法测定病毒感染滴度;以腺病毒为载体将SPK1基因导入肝癌细胞BEL-FU;分别以酶活性检测试剂盒、MTT法检测SPK酶活性及SPK1对肝癌细胞凋亡特性的影响。结果:获得高滴度的Ad-SPK1WT腺病毒和Ad-H1-SPK1腺病毒;携带Ad-SPK1WT基因的BEL-FU细胞中SPK1酶活性增强并抑制DMS(N,N,-二甲基鞘氨醇)对BEL-FU的细胞毒作用,抑制肿瘤细胞凋亡;携带Ad-H1-SPK1基因的BEL-FU细胞中SPK1酶活性降低并增强DMS(N,N,-二甲基鞘氨醇)对BEL-FU的细胞毒作用,促进肿瘤细胞凋亡。结论:阻断SPK1作用可能成为肝癌治疗的新途径。Objective： To investigate the role of sphingosine kinase 1（SPK1） on the apoptosis of human hepatocellular carcinoma cell line BEL-FU.Methods：The adenovirus carrying the wild type SPK1 gene（SPK1WT） and SiRNASPK1（Ad-H1-SPK1） were constructed respectively;viral infection titer was determined by TCID50 and CPE.Methods： Cellular SPK enzyme activity was assayed;the effect of SPK1 on the apoptosis of BEL-FU was evaluated by MTT.Results： Readenoviruses were amplified and purified;SPK enzyme activity assay suggested SPKWT could increase SPK activity and suppress the effect of DMS on BEL-FU,while Ad-H1-SPK1 could decrease SPK activity respectively and enhance the effect of DMS on BEL-FU.Conclusion： SiRNASPK1 could become a new method for hepatocellular carcinoma treatment.

关 键 词：鞘鞍醇激酶 肝肿瘤 细胞凋亡 

分 类 号：R735.7[医药卫生—肿瘤]