抗CD20单链抗体与力达霉素强化融合蛋白的制备及其抗肿瘤活性  

作　　者：房虹[1,2] 苗庆芳[1] 张胜华[1] 程昕[3] 熊冬生[3] 甄永苏[1] 

机构地区：[1]中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所,北京100050 [2]中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院肿瘤研究所,北京100021 [3]中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所,天津300020

出　　处：《中国科学：生命科学》2011年第1期22-29,共8页Scientia Sinica(Vitae)

基　　金：国家高技术研究发展计划(批准号:2006AA02A255);国家自然科学基金(批准号:30701029);国家科技重大专项(批准号:2009ZX09103-720和2010ZX09401-407)资助项目

摘　　要：抗体融合蛋白是新一代抗肿瘤抗体药物.CD20在约95%的B细胞非霍奇金淋巴瘤表面过度表达,是治疗B细胞淋巴瘤的理想靶点.力达霉素(LDM)是强效烯二炔抗肿瘤抗生素,目前已进入Ⅱ期临床阶段.采用DNA重组技术,利用大肠杆菌表达体系,制备抗CD20单链抗体与力达霉素辅基蛋白LDP的基因工程融合蛋白scFv-LDP.经纯化和复性后,ELISA和间接免疫荧光实验测定其抗原结合活性,发现抗CD20scFv-LDP能够与表达CD20的肿瘤细胞特异性结合.将其与LDM的活性发色团AE进行分子组装,得到强化融合蛋白scFv-LDP-AE.MTT结果表明,和LDM一样,scFv-LDP-AE对肿瘤细胞有强烈的杀伤作用,CD20+的Raji细胞和Daudi细胞的IC50值分别为1.21×10-11和6.24×10-11mol/L.CD20+B细胞淋巴瘤裸鼠移植模型检测抗肿瘤活性.接种肿瘤后第14和21天分别尾静脉注射给药,共2次.发现scFv-LDP-AE能够显著抑制肿瘤生长,0.3mg/kg剂量组抑瘤率为79.3%,显著强于LDM可耐受剂量0.05mg/kg(68.6%)的抑瘤率.强化融合蛋白scFv-LDP-AE有发展成抗肿瘤抗体靶向药物的潜能.

关 键 词：淋巴瘤 CD20 力达霉素 单链抗体 强化融合蛋白 

分 类 号：R96[医药卫生—药理学]