一种肺癌新耐药基因的反义基因抑制Bcl-2基因在人耐药小细胞肺癌细胞表达的研究  

Effects of a new drug-resistance antisense gene on Bcl-2 expression of drug-resistant human small cell lung cancer cells

作　　者：李树钧[1] 钱桂生[1] 王关嵩[1] 戢福云[1] 周向东[1] 张芳[1] 冯起甲[1] 

机构地区：[1]第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所,重庆400037

出　　处：《中华肺部疾病杂志（电子版）》2008年第1期99-102,共4页Chinese Journal of Lung Diseases(Electronic Edition)

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30270591);中国博士后科学基金资助项目(2004035528)

摘　　要：目的通过构建一种肺癌新耐药相关基因的反义基因,抑制该基因在人耐药小细胞肺癌H466/CDDP细胞中的表达,进一步研究新耐药相关基因的功能和调控。方法构建该新耐药相关基因的反义基因逆转录病毒载体,通过RT-PCR检验转染新耐药相关基因的反义基因或空载体的人耐药小细胞肺癌H466/CDDP细胞中该基因mRNA的表达,使用MTT方法检测人耐药小细胞肺癌H466/CDDP细胞对化疗药物的敏感性。采用免疫组织化学方法研究人耐药小细胞肺癌抗凋亡基因Bcl-2的表达。结果成功构建新耐药相关基因的反义基因逆转录病毒载体。药物敏感性检测显示,与空载体组相比,转染新耐药相关基因反义基因的耐药小细胞肺癌细胞H446/CDDP对部分化疗药物的敏感性增强,差异显著(P<0.01)。免疫组织化学方法显示转染新耐药相关基因反义基因的耐药小细胞肺癌细胞H446/CDDP抗凋亡基因Bcl-2的表达,与空载体组相比明显减弱(P<0.01)。结论新耐药相关基因是与CDDP致人耐药小细胞肺癌H466/CDDP细胞耐药密切相关的一条新基因。该新耐药相关基因的反义基因能够抑制抗凋亡基因Bcl-2的表达,可能在肺癌MDR发生中的起着重要作用。Objective To evaluate the effects of a new drug-resistance antisense gene on Bcl-2 expression of drug-resistant human small cell lung cancer（SCLC） H446/CDDP cells.Methods An expression recombinant of antisense gene was constructed with the new drug-resistance gene and a retroviral vector.It was transfected to drug-resistant human small cell lung cancer（SCLC） cell H446/CDDP cells.The susceptivity to chemotherapy of H446/CDDP cells was assayed by MTT colorimetry.The expression of Bcl-2 gene of cancer cells was assayed by immune histochemical method.Results An expected recombinant was successfully constructed.Compared with that in the control group transfected with void vector,the susceptivity to some chemotherapeutic drug increased after antisense gene transfection（P0.01）.There was less expression of Bcl-2 gene in recombinant-transfected H446/CDDP cells,but more in the control group with void vector（P0.01）.Conclusion The new drug-resistance antisense gene can increase the susceptivity to some chemotherapeutic drug of drug-resistant human SCLC H446/CDDP cells,and can inhibit Bcl-2 gene expression on drug-resistant human SCLC H446/CDDP cells.

关 键 词：肺癌 基因表达 BCL-2基因 凋亡 

分 类 号：R734.2[医药卫生—肿瘤] R392.11[医药卫生—临床医学]