hsa-mir-520真核表达载体的构建及对E-钙粘蛋白表达的影响  

作　　者：张潞渝[1] 孔璟[2] 李春蕾[3] 高剑[2] 叶彬[1,2] 武卫华[1,2] 刘革力[1] 

机构地区：[1]重庆医科大学分子医学与肿瘤中心,重庆400016 [2]重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室,重庆400016 [3]重庆医科大学附属第一医院妇产科,重庆400016

出　　处：《第三军医大学学报》2011年第9期967-969,共3页Journal of Third Military Medical University

摘　　要：目的构建hsa-mir-520真核表达载体,并转染大肠癌细胞SW-480细胞,检测细胞中E-钙粘蛋白表达情况。方法依据miRBase数据库中hsa-mir-520序列,设计并合成寡核苷酸片段,构建hsa-mir-520表达载体和对照载体。采用脂质体转染方法分别将mir-520表达载体、及对照质粒转染大肠癌细胞SW-480细胞株。采用酶切、测序检测载体构建;Western blot检测E-钙粘蛋白的表达。结果酶切和测序表明hsa-mir-520真核表达载体构建成功。Western blot结果显示与转染对照质粒和未转染的细胞相比,转染了hsa-mir-520重组质粒的细胞中E-cadherin蛋白的表达明显增加(P<0.01),密度扫描半定量分析显示E-cadherin蛋白的表达增加了大约40%。结论成功构建了hsa-mir-520和对照的真核表达载体,hsa-mir-520质粒转染大肠癌细胞SW-480后可增加E-钙粘蛋白的表达。

关 键 词：hsa-mir-520 E-钙粘蛋白 SW-480细胞 

分 类 号：R394-33[医药卫生—医学遗传学] R735.34[医药卫生—基础医学]