利福霉素酶的分离纯化及主要性质  

The Study of Purifying and the Main Characteristics of Rifase

作　　者：吴文芳[1] 杨俊森[1] 曾青[1] 斯琴 吕安国[1] 张成刚[1] 

机构地区：[1]中科院沈阳应用生态研究所,沈阳110015

出　　处：《沈阳药科大学学报》1999年第4期285-289,共5页Journal of Shenyang Pharmaceutical University

基　　金：国家自然科学基金!No .3 95 70 0 2 0

摘　　要：利福霉素SV发酵液经盐析和透析后,再经DEAE52和SephadexG100进一步分离纯化,获得聚丙烯酰胺疑胶电泳均一的利福霉素酶,该酶最适反应温度为30～35℃,酶活性的最适pH值在70～75之间,其分子质量为28×104,由单一亚基组成.酶的氨基酸组成测试结果表明此酶含有咪唑基、巯基和α氨基3个常见的活性功能团,而且每个酶分子中含有1个铜离子,为一金属酶.ArifasewhichisasinglebandelectrophoresedbySDS PAGEwasseparatedandpuri fiedfromthefermentationliquidofRifamycinSVbymeansofsaltingoutanddialysis,andthen byDEAE5 2 andSephadexG 1 0 0chromatograph .Thespecificactivityofdecreasingrifamycinbio logicalactivitiesofrifasewas 660 0 3U/mg .Theoptimumreactiontemperaturewas 3 0～ 3 5℃ . TheoptimumpHwasbetween 7 0～ 7 5.Themolecularweightwas 2 8× 1 0 4.Itwascomprised ofasinglesubunit.Experimentalresultsshowedthisenzymecontainedimidazole ,mercaptogroup , α aminothreecommonfunctionalgroup .EverymoleculecontainedaCu2 + ion ,soitwasametal enzyme .

关 键 词：利福霉素SV 利福霉素酶 分离纯化 发酵 代谢调控 

分 类 号：Q550.3[生物学—生物化学] TQ465[化学工程—制药化工]