钙结合蛋白S100A8和S100A9的异源二聚体体外构建  被引量:1

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作  者:秦凤金[1] 段晓华[1] 殷红梅[1] 盛梅[1] 丁雪涛[1] 

机构地区:[1]胜利油田中心医院,山东东营257000

出  处:《山东医药》2011年第19期37-38,共2页Shandong Medical Journal

摘  要:目的体外构建S100A8和S100A9的异源二聚体(S100A8/S100A9),为其分子生物学功能研究提供依据。方法原核表达载体pET28 a-S100A8和pET28 a-S100A9分别转化感受态细胞BL21,并用异丙基硫化-β-D半-乳糖苷(IPTG)诱导表达蛋白,N i-NTA H is柱纯化蛋白,将等量纯化蛋白在一定钙离子浓度下室温孵育30 m in,通过SDS-PAGE和W estern b lot方法验证异源二聚体的形成。结果质粒pET28 a-S100A8和pET28 a-S100A9在相对分子质量约11 kD和14 kD处出现新生的蛋白条带,可溶性分析发现两个蛋白均可以以可溶的形式存在,纯化后得到了目的蛋白,S100A8和S100A9室温孵育后形成了异源二聚体。结论 S100A8和S100A9蛋白可以在体外形成异源二聚体。

关 键 词:钙结合蛋白S100A8 钙结合蛋白S100A9 异源二聚体 表达 纯化 

分 类 号:Q503[生物学—生物化学] R730.5[医药卫生—肿瘤]

 

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