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作 者:张蕾[1] 刘鸿瑞[1] 刘彤华[1] 程书均[2]
机构地区:[1]中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院病理科,北京100730 [2]中国医学科学院肿瘤研究所
出 处:《中华病理学杂志》1999年第4期277-280,共4页Chinese Journal of Pathology
基 金:中国医学科学院科研基金
摘 要:目的 观察EpsteinBarr 病毒(EBV) 对支气管上皮细胞的转化作用。方法 用EBNA2和LMP1 的真核表达质粒同时转染永生化人胚支气管上皮细胞系TR,经潮霉素B 筛选得到稳定转化细胞TR/LMP1EBNA2 。结果 原位杂交和Western blot 证实TR/LMP1EBNA2 有EBNA2 和LMP1 的mRNA和蛋白表达。生长曲线,MTT显示细胞增殖能力增强,软琼脂集落形成率TR/LMP1EBNA2 为50 .1‰,68 .2‰, 而空载体转染细胞TR/Hyg 为2.0 ‰,3.0 ‰,TR细胞为1 .0‰,0.7‰。结论 LMP1和EBNA2 的表达使永生化支气管上皮细胞停泊依赖性降低,生长加快,细胞表型倾向更进一步转化,提示EBV在肺癌发生中可能起一定作用。Objective To observe Epstein Barr virus (EBV) dependent transformation of human bronchial epithelium. Methods Eukaryotic expression plasmide pBS LMP Hyg and pSG5 EBNA2 Hyg were transfected into immortalized human bronchial epithelium cell line TR.Results In situ hybridization and Western blot confirmed EBNA2 and LMP1 expression in one hygromycine B resistant cell clone TR/LMP1 EBNA2. Growth curve and MTT value showed that transformed cells grew faster. Soft agar plating rate of TR/LMP1 EBNA2 was 50.1‰, 68.2‰, empty vector PBs Hyg transfected cell strain TR/Hyg 2.0‰, 3.0‰,TR 11.0‰, 0.7‰. Conclusion Expression of both LMP1 and EBNA2 led to decreased anchorage dependence and increased proliferation rate of TR, thereby further transformed immortalized human bronchial epithelium. Our results suggest that EBV may play a role in genesis of lung cancer.
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