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检 索 范 例 :范例一: (K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 范例二:J=计算机应用与软件 AND (U=C++ OR U=Basic) NOT M=Visual
机构地区:[1]武警兵团指挥部医院,乌鲁木齐830063 [2]新疆医科大学第一附属医院
出 处:《山东医药》2011年第21期79-80,共2页Shandong Medical Journal
摘 要:目的观察Raf激酶抑制蛋白(RKIP)对儿童白血病细胞系CCRF-CEM凋亡的影响。方法以RT-PCR方法从HepG2细胞总RNA中克隆RKIP基因CDS区,并亚克隆至pCDNA3.0质粒,构建RKIP重组质粒载体pCD-NA3.0-RKIP,以电穿孔法转染pCDNA3.0-RKIP与对照质粒pCDNA3.0至儿童白血病细胞系CCRF-CEM,建立过表达RKIP的细胞系。Western blot法检测转染48 h后细胞RKIP与磷酸化ERK的表达水平。转染72 h后,用Annex-in-V与PI双标、流式细胞仪检测细胞凋亡比例。结果成功构建携带RKIP的重组质粒载体pCDNA3.0-RKIP,通过电穿孔转染,在CCRF-CEM细胞成功高表达。与对照细胞相比,RKIP过表达CCRF-CEM细胞磷酸化ERK水平降低,凋亡比例显著增高(P<0.01)。结论 RKIP过表达诱导CCRF-CEM细胞凋亡,可能机制是通过抑制Ras-ERK信号通路。
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