双链引物聚合酶链反应  

Double strand primered polymerase chain reaction

作　　者：夏庆杰[1] 张思仲[1] 丁兰[1] 武辉[1] 

机构地区：[1]华西医科大学附属第一医院医学遗传室,成都610041

出　　处：《中华医学遗传学杂志》1999年第5期331-332,共2页Chinese Journal of Medical Genetics

基　　金：国家自然科学基金;四川省计生委科研基金

摘　　要：目的　建立一种操作简单、不仅能够在反应开始之前发挥预防和降低非特异性扩增，而且能够在整个反应过程中都发挥这种作用的 Ｄ Ｎ Ａ 体外扩增技术。方法　人工合成脆性 Ｘ 智力低下１ 号基因（ Ｆ Ｍ Ｒ１）５′非翻译区序列特异单链引物和与其互补的引物，并将后者的３′末端进行修饰，使其失去延伸能力；最后将它们混合并退火成双链引物，再将双链引物加入 Ｐ Ｃ Ｒ 反应体系中进行热循环扩增。结果　在１５ 个标本的双链引物 Ｐ Ｃ Ｒ 反应中都得到了较使用常规 Ｐ Ｃ Ｒ 特异性更高的扩增产物。结论　双链引物 Ｐ Ｃ Ｒ 是一种特异性更好的 Ｄ Ｎ Ａ 体外扩增技术。Objective To develop a simple and reliable method for DNA amplification.Methods Double strand primers of fragile X mental retardation 1 gene (FMR1) were generated and used to amplify DNAs that were roughly extracted from human peripheral blood.Results All products from 15 DNA samples by double strand primered polymerase chain reaction(DSP PCR) were more specific than those amplified by routine PCR. Conclusion The double strand primers reported here may increase the specificity of PCR amplification.

关 键 词：双链引物 聚合酶链反应 特异性 基因诊断 

分 类 号：R596.04[医药卫生—内科学] R394[医药卫生—临床医学]