肝癌细胞中Wnt／β-连环素信号通路与caspase-3、X连锁凋亡抑制蛋白和葡萄糖调节蛋白78的表达  

Wnt/β-catenin signaling pathway affects the protein expressions of caspase-3, XIAP and Grp-78 in hepatocellular carcinoma

作　　者：王新红[1] 孟祥伟[1] 孙逊[2] 杜雅菊[3] 赵晶[3] 范玉晶[3] 

机构地区：[1]吉林大学第一医院消化中心,长春130012 [2]吉林大学第一医院病理科,长春130012 [3]哈尔滨医科大学附属第二医院消化内科

出　　处：《中华肝脏病杂志》2011年第8期599-602,共4页Chinese Journal of Hepatology

基　　金：基金项目：吉林省科技厅国际科技合作项目（20080724）

摘　　要：目的研究肝细胞癌中Wnt／β-连环素信号传导通路与caspase-3、X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）、葡萄糖调节蛋白78（Grp-78）、热休克蛋白（HSP）27的关系及其意义。方法用RNAi技术将针对β-连环素的sIRNA转染入肝癌HepG2细胞中沉默β-连环素基因表达，于72、96h提取蛋白质，用Western blot法检测β-连环素、caspase-3、XIAP、Grp-78、HSP27蛋白质的表达。用方差分析的方法进行统计学分析。结果对照组、转染72h组、转染96h组β-连环素蛋白质表达的灰度值分别为18．9、1．5和3．2；β-肌动蛋白表达的灰度值分别为41．1、45．6和47．8；caspase-3蛋白质表达的灰度值分别为49．8、5．2和45．1；p-caspase-3蛋白质表达的灰度值分别为16．0、67．7和16．3；XIAP蛋白质表达的灰度值分别为28．2、21．9和49．9；Grp-78蛋白质表达的灰度值分别为23．3、49．9和26．8；HSP27蛋白质表达的灰度值分别为29．6、34．8和35．6；β-肌动蛋白表达的灰度值分别为32．1、33．6和34．2。针对β-连环素的siRNA转染肝癌HepG2细胞72h和96h均可抑制β-连环素蛋白质的表达（F=160．72，P〈0．01），而96h比72h的表达略有增加，差异有统计学意义。caspase-3的蛋白质表达于72h被抑制，96h升高恢复至原有水平（F=136．10，P〈0．01）；而p-caspase-3的蛋白质表达于72h增加，96h减少至原有水平（F=98．65，P〈0．01）。XIAP的蛋白质表达于72h被抑制，96h表达升高（F=37．29，P〈0．01）。Grp-78的蛋白质表达于72h增加，96h减少至原有水平（F=58．72，P〈0．01）。HSP27的蛋白质表达转染前后一致，差异无统计学意义。结论HepG2细胞中，Wnt／β-连环素信号传导通路与caspase-3、XIAP、Grp-78蛋白质的表达有关，而与HSP27的蛋白质表达无关。Wnt／β-连环素信号传导通路正是通过调节这些因子参与HepG2细胞凋亡及增殖、分化等调节。Objective To investigate the relationship and significance of Wnt/β-catenin signaling pathway with caspase-3, XIAP, HSP27and Grp-78. Methods The HCC cell line HepG2 was transfected with small interfering RNA （siRNA） directed against β-catenin. After 72 and 96 h, protein was extracted and the protein expressions of β-catenin, caspase-3, XIAP, Grp-78 and HSP27 were detected by Western blot. Results β-catenin protein expression was inhibited at both time points and the expression at 96 h was higher than that at 72 h （F = 160.72, P 〈 0.01）. Interestingly, Caspase-3 protein expression was decreased at 72 h and increasedto normal at 96 h （F= 136.10,P 〈 0.01）, while p-caspase-3 protein expression increased at 72 h and decreased to normal at 96 h （F = 98.65, .P 〈 0.01 ）. XIAP protein expression decreased at 72 h （F = 37.29, P 〈 0.01）and increased at 96 h. Grp-78 protein expression increased at 72 h and decreased to normal at 96 h （F = 58.72, P 〈 0.01）. HSP27 protein expression showed no change following transfection （ F = 1.91, P 〉 0.05）. Conclusions Wnt/β-catenin signaling pathway is related to the protein expressions of caspase-3, XIAP and Grp-78, but not related to HSP27 protein expression in HCC. Wnt/β-catenin signaling pathway may participate in the regulation ofHCC apoptosis, proliferation and differentiation through affecting these factors.

关 键 词：癌 肝细胞 核糖核苷酸类 信号传导 细胞凋亡 热休克蛋白质类 Β-连环素 

分 类 号：R735.7[医药卫生—肿瘤]