17-β雌二醇对SKOV3细胞HOXA10基因表达及甲基化的影响  

Effects of 17-β estradiol on the expression and methylation of HOXA10 gene in SKOV3 cells

作　　者：汤伟伟[1] 万贵平 花蕾[3] 程文俊[4] 

机构地区：[1]南京医科大学第一临床医学院,210029 [2]江苏省中西结合医院妇产科 [3]南京医科大学第一附属医院妇科 [4]常州市第二人民医院妇科

出　　处：《江苏医药》2011年第16期1868-1871,共4页Jiangsu Medical Journal

基　　金：江苏省科技厅自然科学基金面上项目(BK2010576);江苏省六大人才高峰(303070774IB09)

摘　　要：目的探讨17-β雌二醇(17-βE2)对人卵巢癌细胞株SKOV3中HOXA10基因表达及基因启动子区CpG岛DNA甲基化的影响。方法体外培养人卵巢癌细胞株SKOV3,按实验目的分别加入1×10-6、1×10-7、1×10-8mol/L的17-βE2培养48h后,收集细胞,分别采用实时荧光定量RT-PCR反应和Westernblot检测HOXA10mRNA和蛋白表达;提取SKOV3细胞基因组DNA,纯化、修饰后用甲基化特异性聚合酶链反应检测HOXA10基因启动子区CpG岛DNA甲基化状态。结果与对照组相比,不同浓度的17-βE2可显著提高SKOV3细胞中HOXA10基因mRNA和蛋白表达(P<0.05)。同时17-βE2作用后HOXA10基因呈部分甲基化状态。结论 17-βE2可以逆转SKOV3细胞中HOXA10基因启动子区CpG岛DNA甲基化状态,使HOXA10基因的表达上调。Objective To investigate the effects of 17-β estradiol（17-β E2） on the expression and methylation of HOXA10 gene in human ovarian adenocarcinoma cell line（SKOV3）.MethodsThe SKOV3 was incubated with 1×10-6,1×10-7 or 1×10-8mol/L 17-β E2 for 48 h.Then the expressions of HOXA10 mRNA and protein were detected by RT-PCR and Western blot.SKOV3 genetic DNA of each group was extracted,purified and modified.DNA methylation status was detected by methylation-specific polymerase chain reaction（MSP）.Results Compared with control,HOXA10 mRNA and protein levels in the SKOV3 were increased by 17-β E2 treatment in a dose-dependent manner（P0.05）.After 48 h long exposure to 17-β E2,HOXA10 promoter region showed partial methylation.Conclusion 17-β E2 can demethylate the promoter of HOXA10 and up-regulate HOXA10 expression in SKOV3.

关 键 词：17-Β雌二醇 SKOV3细胞 HOXA10基因 DNA甲基化 

分 类 号：R737[医药卫生—肿瘤]