肿瘤相关钙信号传导蛋白-2基因对乳腺癌细胞转移能力的影响  

Influence of TROP-2 gene on the ability of human breast cancer cell metastasis

作　　者：俞力[1] 范钰[1] 邱志远[1] 周永静[1] 龚丹丹[1] 肖秀娣[1] 武正炎[1] 

机构地区：[1]江苏大学附属医院内分泌科,江苏省南京212001

出　　处：《中国基层医药》2011年第15期2017-2019,I0003,共4页Chinese Journal of Primary Medicine and Pharmacy

基　　金：江苏省镇江市2009年度科技计划项目（SS2009012）

摘　　要：目的探讨TROP-2基因小干扰RNA（siRNA）对乳腺癌细胞黏附和侵袭力的影响。方法培养人乳腺癌Bcap-37、LCC1、MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435、MDA—MB-468及ZR75-1细胞株，以荧光实时定量PCR方法检测TROP-2基因mRNA表达；筛选出TROP-2表达最高者。采用TROP-2基因小干扰RNA转染乳腺癌细胞，分别以荧光实时定量RT-PCR和免疫荧光方法观察TROP-2基因mRNA和蛋白水平，然后以四唑蓝（MTT）比色法检测细胞黏附性，以Transwell方法检测癌细胞侵袭能力。结果7株乳腺癌细胞中，TROP-2均有不同程度的表达，以MCF-7细胞最高；以TROP-2siRNA转染乳腺癌MCF-7细胞后，癌细胞TROP-2基因mRNA和蛋白水平明显下降，且呈浓度依赖性；黏附试验结果显示，5、10、20nMsiRNA组黏附率分别为（52．9±2．5）％、（25．6±2．3）％、（12．8±2．2）％（P〈0．01）；Transwell试验结果显示，5、10和20nMsiRNA组穿过滤膜的细胞分别为（78±17）、（39±15）、（19±16），而对照组分别为（136±25）、（139±21）（P〈0．01）。结论TROP-2基因在乳腺癌细胞黏附和侵袭中发挥着重要作用；以siRNA转染乳腺癌细胞，可抑制乳腺癌细胞黏附和侵袭能力。Objective To study the effects of tumor-associated calcium signal transducer-2 （TROP-2） gene small interfering RNA（siRNA）on adhesion and invasion of human breast cancer cell. Methods Real time PCR was used to evaluate the TROP-2 mRNA of seven human breast cancer cell lines Bcap-37 ,LCC1 ,MCF-7 ,MDA-MB-231, MDA-MB-435, MDA-MB-468,and ZR75-1. The cell line of TROP-2 highest expression was transfected with different dose of TROP-2 siRNA. The expression of TROP-2 mRNA and protein were determined by Real-time quantitative PCR and immumofiurescence method. The cell adhesion was evaluated by MTT assay, and invasion was exmined by boyden chamber,respectively. Results Cell line MCF-7 showed the highest elevation of TROP-2 mRNA in seven breast cancer cell lines. The results from real-time quantitative PCR and immumoflurescence method showed that TROP-2 mRNA and protein reduced in time-and dose-dependent manners（ P 〈 0.01 ; P 〈 0.01 ）. The adhesive rate of siRNA groups （ 5 nM, 10 nM, and 20 nM ） was （ 52.9 ± 2.5 ） %, （25.6 ± 2.3 ） %, （ 12.8 ± 2.2 ） % （ P 〈 0.01 ） , respectively. The transwen results showed that the invasion cells was （78 ± 17 ）, （ 39 ±15 ）, （ 19 ± 16 ）, （ 136 ± 25 ） and （ 139 ± 21 ） in different groups（5,10,20 nM siRNA,and controls） ,respectively（P 〈0. O1 ）. Conclusion TROP-2 gene might play an important role in adhesion and invasion of human breast cancer cell. siRNA targeted TROP-2 could effectively inhibit adhesion-and invasion of human breast cancer cell.

关 键 词：乳腺肿瘤 肿瘤相关钙信号传导蛋白-2 

分 类 号：R737[医药卫生—肿瘤]