pAd-shRNA-IGF-1对SD孕鼠背根神经节神经元突起生长的影响  

作　　者：王瑞丽[1] 姚俊[1] 

机构地区：[1]河南科技大学第一附属医院,河南洛阳471003

出　　处：《山东医药》2011年第34期27-29,共3页Shandong Medical Journal

摘　　要：目的观察重组腺病毒介导的干扰胰岛素样生长因子1(IGF-1)的短发夹RNA(shRNA)对SD孕鼠背根神经节神经元(DRGn)突起生长的影响。方法设计、合成三对靶向IGF-1的单链寡核苷酸,经变性、退火为双链寡核苷酸并插入pENTR/U6质粒载体;测序正确后经LipofectamineTM2000转染胰腺癌MIA PACA-2细胞,采用RT-PCR法选出对IGF-1干扰效果最佳的pENTR/U6-shRNA-IGF-1质粒,将其与pAd/BLOCK-iTTM-DEST骨架质粒同源重组,用HEK293A细胞包装出表达shRNA-IGF-1的重组腺病毒后测定病毒滴度。将pAd-shRNA-IGF-1感染MIAPACA-2细胞,采用免疫细胞化学法检测细胞内的IGF-1。将构建的pAd-shRNA-IGF-1感染MIA PACA-2细胞,然后与SD孕鼠DRGn体外共培养,显微镜下观察其形态变化及生长情况。结果与未感染pAd-shRNA-IGF-1的MIAPACA-2细胞共培养的DRGn,其突起逐渐增多并相互连接成网状,形成稀疏的神经网络;而与感染pAd-shRNA-IGF-1的MIA PACA-2细胞共培养的DRGn,其细胞数量较前稍减少,并没有形成网状结构,只见到少量小的神经突起。结论 pAd-shRNA-IGF-1可抑制SD孕鼠DRGn轴突的生长。

关 键 词：腺病毒 胰岛素样生长因子-1 短发夹RNA 神经元 轴突 胰腺癌 

分 类 号：R735.9[医药卫生—肿瘤]