隐性核不育芝麻AFLP反应体系的优化  

Optimization of AFLP reaction system in recessive-male sterile Sesamum indicum L.

作　　者：杨敏敏[1] 刘红艳[1] 左阳[1] 赵应忠[1] 

机构地区：[1]中国农业科学院油料作物研究所/农业部油料作物生物学重点开放实验室,武汉430062

出　　处：《华中农业大学学报》2011年第6期667-670,共4页Journal of Huazhong Agricultural University

基　　金：国家科技支撑计划项目(2009BADA8B04);国家芝麻产业技术体系(CARS-15-1-03);湖北省自然科学基金重点项目(2010-35);中国农业科学院油料作物研究所所长基金项目(1610172011007)

摘　　要：以芝麻细胞核雄性不育系95ms-5为材料,对AFLP反应体系中的酶切连接、预扩增和选择性扩增中的关键性因素进行了优化。结果表明,在模板DNA质量浓度为200ng/μL、37℃酶切连接6h的情况下,预扩增中最佳Mg2+浓度为1.0mmol/L,dNTP最佳浓度为0.3mmol/L,Taq酶量以0.5U为宜,预扩增引物终浓度为0.4mmol/L;选择性扩增中,预扩增产物稀释10倍后,以Mg2+0.8mmol/L、dNTP 0.2mmol/L、Taq酶1.0U、选扩引物0.6mmol/L为宜。Key factors affecting the digestion-ligation,pre-amplification and selective amplification in amplified fragment length polymorphism（AFLP） analysis in sesame（Sesamum indicum L.） were optimized.Results showed that the best protocol was 200 ng/μL template DNA,digestion-ligation at 37 ℃ for 6 h,1.0 mmol/L Mg2＋,0.3 mmol/L dNTP,0.5 U Taq DNA polymerase in the pre-amplification system and pre-amplification products diluted by 10 times,1.0 mmol/L Mg2＋,0.2 mmol/L dNTP,and 1.0 U Taq DNA polymerase,0.6 mmol/L primers in the selective amplification.

关 键 词：油料作物 芝麻 AFLP 反应体系 优化 

分 类 号：S565.350.353[农业科学—作物学]