马尔堡病毒核蛋白的原核表达及纯化  

Prokaryotic Expression and Purification of Nucleoprotein of Marburg Virus

作　　者：王皓婷[1,2] 王水明[3] 史子学[1] 邵东华[1] 魏建超[1] 刘学辉[3] 王志亮[4] 王雪敏[2] 马志永[1] 

机构地区：[1]中国农业科学院上海兽医研究所兽医公共卫生研究室,上海200241 [2]河北工程大学农学院,河北邯郸056001 [3]南京出入境检验检疫局,江苏南京211106 [4]中国动物卫生与流行病学中心,山东青岛266114

出　　处：《中国动物检疫》2011年第10期35-37,共3页China Animal Health Inspection

基　　金：公益性行业(农业)科研专项经费(200903037-06);江苏检验检疫局科技计划项目(2011KJ03)

摘　　要：目的以原核表达的方式获得了马尔堡病毒的核蛋白,并纯化。方法将马尔堡病毒核蛋白基因亚克隆到原核表达质粒pET-28(a)中,构建重组表达质粒pET-28(a)-M-NP,并将重组质粒用热休克方法转化BL21(DE3)感受态细菌,用IPTG诱导蛋白表达后,以SDS-PAGE分析表达形式及表达量,并利用His-Band Ni+柱纯化。结果成功构建重组表达质粒pET-28(a)-M-NP,以1.0mmol/L终浓度的IPTG在37℃诱导表达5h后,破菌沉淀中有目的蛋白表达。结论成功表达并纯化了马尔堡病毒的核蛋白,为后续研究奠定了基础。Objective To obtain recombinant protein of the nucleoprotein （NP） of Marburg virus using prokaryotic expression system. Synthesized NP gene was sub-cloned to generate pET-28 （a） -M-NP recombinant plasmid, and then transformed into E.eoli BL21 （DE3） competent bacteria.The expression of NP recombinant protein was induced by IPTG and analyzed by SDA-PAGE. The expressed protein was purified using His-Band Ni ＋ affinity chromatography and identified by Western blot. Results The recombinant expression plasmid pET-28 （a） -M-NP was obtained and the recombinant NP protein was expressed and purified. Conclusion The NP recombinant protein was expressed and characterized.

关 键 词：马尔堡病毒 NP蛋白 原核表达 蛋白纯化 

分 类 号：S852.659.5[农业科学—基础兽医学]