地塞米松和淀粉样β蛋白片段25-35对PC12细胞损伤和凋亡的影响  

Effect of dexamethasone and amyloid beta protein fragment 25-35 on PC12 cells injury and apoptosis

作　　者：李维祖[1] 张文[2] 李侠[1] 尹艳艳[1] 李卫平[1,3] 

机构地区：[1]安徽医科大学药理学教研室,抗炎免疫药理学省部共建教育部重点实验室,国家中医药管理局中药药理三级实验室,安徽合肥230032 [2]皖南医学院弋矶山医院药剂科,安徽芜湖230000 [3]安庆医药高等专科学校,安徽安庆246003

出　　处：《中国药理学与毒理学杂志》2011年第5期430-435,共6页Chinese Journal of Pharmacology and Toxicology

基　　金：安徽省高校省学术带头人科学研究资助(2005hbz18);安徽省人才基金(2007Z030);安徽省教育厅自然科学项目(KJ2009A81),安徽省教育厅自然科学项目(KJ2010B378)~~

摘　　要：目的探讨地塞米松(DEX)和淀粉样β蛋白片段25-35(Aβ25-35)联合作用对PC12细胞损伤和凋亡的影响。方法采用单独或联合应用DEX 0.1～10μmol.L-1和Aβ25-35 1～5μmol.L-1作用PC12细胞24 h,MTT法测定细胞活力;膜联蛋白-Ⅴ,PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率,PI单染流式细胞仪检测细胞凋亡峰;逆转录-PCR检测胱天蛋白酶3 mRNA的表达水平。结果 MTT结果显示,与正常对照组相比,DEX 5和10μmol.L-1,Aβ25-35 1,5和10μmol.L-1,DEX 5+Aβ25-35 1,5和10μmol.L-1及DEX 10+Aβ25-35 5,10μmol.L-1组均可明显降低PC12细胞存活率,而DEX联合Aβ25-35能明显减少PC12细胞数(P<0.01)。流式细胞仪结果显示,DEX 5μmol.L-1和Aβ25-35 1μmol.L-1单独作用对PC12细胞凋亡率和亚二倍体凋亡峰有一定的增加作用(P<0.05),两者联合作用能明显增加PC12细胞早期和中晚期凋亡率,增加亚二倍体凋亡峰(P<0.01);RT-PCR结果显示,DEX 5μmol.L-1和Aβ25-35 1μmol.L-1单独作用对PC12细胞胱天蛋白酶3 mRNA的表达水平没有明显影响,它们联合作用能明显增加PC12细胞胱天蛋白酶3mRNA的表达水平(P<0.05)。结论 DEX和Aβ25-35联合作用能明显增加对PC12细胞的损伤,促进胱天蛋白酶3 mRNA表达,诱导PC12细胞凋亡。OBJECTIVE To study the effect of dexamethasone（DEX） and amyloid beta protein fragment 25-35（Aβ25-35） on PC12 cells injury and apoptosis.METHODS DEX 0.1-10 μmol·L-1 and Aβ25-35 1-5 μmol·L-1 were administered alone or in combination to PC12 cells.PC12 cells survival was detected by MTT assay.PC12 cells apoptosis was detected by flow cytometer with Annexin-Ⅴ/PI double stain and PI single stain.Caspase 3 mRNA level in PC12 cells was detected by RT-PCR.RESULTS MTT results showed that,DEX 5,10 μmol·L-1,Aβ25-35 1,5,10 μmol·L-1,DEX 10＋Aβ25-35 1,5,10 μmol·L-1 and DEX 5＋Aβ25-35 5 and 10 μmol·L-1 could decrease PC12 cells survival after 24 h treatment.While combination of DEX with Aβ25-35 could significantly decrease PC12 cells number（P〈0.01）.DEX 5 μmol·L-1,Aβ25-35 1 μmol·L-1 could increase the apoptotic rate of PC12 cells.And DEX 5＋Aβ25-35 1 μmol·L-1 could significantly increase the apoptotic rate of PC12 cells（P〈0.01）.Single DEX 5 or Aβ25-35 1 μmol·L-1 had no significant effect on caspase 3 mRNA levels,but DEX 5 μmol·L-1＋Aβ25-35 1 μmol·L-1 could significantly increase caspase 3 mRNA levels.CONCLUSION Combination of DEX with Aβ25-35 can significantly increase the injury and apoptosis in PC12 cells.

关 键 词：地塞米松 淀粉样Β蛋白 阿尔茨海默病 细胞凋亡 

分 类 号：R749.16[医药卫生—神经病学与精神病学]