J亚型禽白血病病毒的拯救与鉴定  

Rescue and identification of the infectious clone of subgroup J avian leucosis virus

作　　者：王超[1,2] 缪华先 谢宝婵 张伟伟[2] 吴润[1] 刘光清[2] 

机构地区：[1]甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州730070 [2]中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241 [3]惠州出入境检验检疫局,广东惠州516001

出　　处：《中国预防兽医学报》2011年第11期837-840,共4页Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine

基　　金：公益性农业科研专项(201003012);863计划(2011AA10A200);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2010JB18)

摘　　要：为鉴定含J亚群禽白血病病毒(ALV-J)全长cDNA分子克隆(pBlALV)的感染性,首先将pBlALV转染CEF细胞,拯救出病毒(rALV),然后连续传代3次,对拯救病毒进行增殖培养。分别利用RT-PCR、westernblot、IFA等方法,对拯救病毒进行鉴定,并应用实时荧光定量PCR方法对拯救病毒的复制动力学进行了测定。研究结果证明,本研究成功拯救出了具有感染性的rALV-J,为研究禽白血病的致病机理和探讨新的防制措施等提供了良好的ALV的反向遗传操作技术平台。To confirm the infectivity of the full-length cDNA clone（pBlALV） of subgroup J avian leucosis virus（ALV-J） HPRS103 strain,pBlALV was transfected into chicken embryo fibroblast（CEF） cells and the ALV was rescued.The rescued ALV（rALV-J） was identified by RT-PCR,western blot and indirect immunofluorescence assay,respectively.Besides,the real-time PCR was applied to evaluate the replication dynamic of the rescued virus.The results showed that the rALV-J was able to well replicate in CEF.This study provides an useful platform for investigation of the pathogenesis and molecular biology of ALV-J.

关 键 词：J亚群禽白血病病毒 ALV-J 感染性克隆 

分 类 号：S852.65[农业科学—基础兽医学]