感染性克隆

作品数：254被引量：390H指数：9
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稳定表达绿色荧光蛋白的盖塔病毒的构建与鉴定
《畜牧与兽医》2025年第3期74-78,共5页姜智文 秦颖 陈杰 粟硕 
三亚崖州湾科技城科技专项资助项目(SCKJ-JYRC-2022-08)。
为了开发表达外源基因的重组盖塔病毒,通过反向遗传技术,在盖塔病毒nsP3基因的C端插入绿色荧光蛋白ZsGreen,并通过转染至BHK-21细胞拯救重组病毒并研究其生长特性。结果:感染性cDNA克隆pSM-GETV-nsP3/ZsGreen转染BHK-21细胞后表达绿色...
关键词：盖塔病毒 感染性克隆 报告病毒 
基因Ⅰ型日本脑炎病毒GX毒株感染性克隆的构建
《中国兽医学报》2025年第3期482-488,共7页颜梦学 叶静 曹胜波 熊俊垚 
国家重点研发计划资助项目(2022YFD1801500,2022YFD1800105);国家自然科学基金重点资助项目(32030107)。
通过RT-PCR方法从基因Ⅰ型(GⅠ)日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)GX株中扩增覆盖全长cDNA的3段基因片段,将3个基因片段依次克隆到pBR322载体上以获得感染性克隆质粒pGX,测序正确后将该感染性克隆质粒与pCAGGS-T_(7)聚合...
关键词：基因Ⅰ型 乙型脑炎病毒 感染性克隆 复制 致病力 
B亚型禽偏肺病毒B1分离株感染性克隆的构建与鉴定
《畜牧兽医学报》2025年第2期788-802,共15页于泽坤 姜承源 袁洪兴 周生 段笑笑 李彦 宋勤叶 
青岛市科技惠民示范专项项目(23-2-8-xdny-14-nsh)。
B亚型禽偏肺病毒(avian metapneumovrus,aMPV)可引起鸡肿头综合征,造成免疫抑制,引发严重的继发感染并导致鸡生产性能下降。建立国内aMPV分离株的反向遗传学系统对病毒研究及开发针对性疫苗具有重要意义。将病毒基因组扩增片段分别测序...
关键词：B亚型禽偏肺病毒 感染性克隆 三质粒 病毒拯救 
置换弱毒C株非编码区的嵌合猪瘟病毒对猪的致病性研究
《动物医学进展》2024年第12期1-8,共8页陈荣 曹统 叶超锋 翁一帆 贾德凯 许翰坤 毛俊勇 韩笑 李肖梁 方维焕 
浙江省重点研发计划项目(2021C0251)。
猪瘟(CSF)是由猪瘟病毒(CSFV)引起的一种高度接触性传染病。研究表明,CSFV的非编码区(UTR)与病毒复制和毒力相关。为了分析置换CSFV弱毒疫苗C株UTR的嵌合毒株对病毒复制和猪致病性的影响,以构建的C株和QZ14(CSFV 2.1 d型毒株)感染性克...
关键词：猪瘟病毒 感染性克隆 致病性 
盖塔病毒感染性克隆及复制型表达载体的构建
《微生物与感染》2024年第5期267-279,共13页王永康 曹恒 龙钢 
上海市重大突发传染病防控关键核心技术研究(ZXS002R2-3)。
本研究利用反向遗传学的方法成功拯救了一株盖塔病毒(Getah virus, GETV)(GenBank:OM363683)。首先,将优化后的病毒序列克隆到含有T7或CMV启动子的低拷贝质粒pFK中,分别命名为T7-GETV和CMV-GETV。以T7-GETV为模板,通过体外转录(in vitro...
关键词：盖塔病毒 感染性克隆 病毒拯救 复制型表达载体 DNA疫苗 
冠状病毒的反向遗传技术及其应用进展
《中国兽医学报》2024年第10期2283-2293,共11页梁纪元 张钰灿 侯锐锋 张粤 夏永豪 袁晋 祖少坡 魏战勇 
国家自然科学基金资助项目(32130106);河南省自然科学基金资助项目(232300421001)。
近年来,由冠状病毒引起的疫病呈现频发、暴发和新发的趋势,造成人类和动物严重的呼吸和消化系统疾病,危害全球公共卫生安全和畜禽健康养殖。目前,对冠状病毒致病、跨种传播等机制的认识不足制约了抗冠状病毒药物和疫苗产品的研制。反向...
关键词：冠状病毒 反向遗传 感染性克隆 酵母TAR技术 
貉源阿留申病毒感染性克隆的构建及病毒拯救
《中国兽医科学》2024年第7期853-858,共6页彭倩文 赵永强 邵西群 王桂武 张傲 陈立志 章秀婷 
吉林省自然科学基金项目(20190201169JC);中国农业科学院科技创新工程项目(CAAS-ASTIP-2021-ISAPS)。
旨在建立貉源阿留申病毒(RFAV)反向遗传系统,为在全基因水平上研究阿留申病毒的致病机制以及疫苗的研制提供平台。前期通过分段克隆成功获得RFAV中间编码区序列M1、M2、M3及末端序列信息。通过无缝克隆技术将RFAV中间编码区序列M1、M2...
关键词：貉源阿留申病毒 感染性克隆 病毒拯救 反向遗传操作系统 
猪繁殖与呼吸综合征病毒GS15株NSP2蛋白多位点缺失病毒的拯救与体外生长特性分析
《微生物学报》2024年第7期2307-2322,共16页张兴民 张婧 孙普 李娇阳 崔占鼎 李国秀 王健 李平花 袁红 李坤 曹轶梅 付元芳 李冬 赵志荀 曾巧英 卢曾军 
国家生猪技术创新中心先导科技项目(NCTIP-XD/C03);甘肃省杰出青年基金(21JR7RA026)。
【目的】本实验室前期在高致病性毒株PRRSV/GSWW/2015的感染性克隆上,拯救获得了非结构蛋白(non-structural protein 2,NSP2)第519-565位和第628-747位氨基酸双缺失的工程病毒(r GS15-?2)。本研究旨在在双缺失病毒的感染性克隆上,构建...
关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 感染性克隆 非结构蛋白2(NSP2) 缺失标记 生长特性 
反向遗传学技术在动物RNA病毒研究中的应用进展
《中国兽医科学》2024年第7期962-967,共6页关飞虎 宋亚芬 温立佳 王丽华 李丹 张辉 张乾义 王静 
国家重点研发计划项目(2022YFD1800601-4)。
反向遗传学操作系统的出现为RNA病毒在体外研究提供了一种重要的技术方法,使在精确位置对病毒基因组进行修饰成为可能。病毒的反向遗传系统通常构建在高拷贝数或低拷贝数的质粒中,通过对基因进行改造或插入外源基因等操作实现对病毒改...
关键词：RNA病毒 反向遗传 病毒拯救 感染性克隆 
猪圆环病毒2型感染性克隆的构建及拯救病毒的双抗体夹心ELISA鉴定被引量：1
《畜牧与兽医》2024年第7期95-101,共7页贺紫琴 宁李纳 范杰 凌同 刘甜甜 李欣 陈志雄 黎满香 葛猛 
国家自然科学基金面上项目(32072871);湖南省重点研发计划项目(2023NK2017);湖南省普通高等学校科技创新团队支持计划项目。
旨在构建猪圆环病毒2型(PCV2)感染性克隆,并利用双抗体夹心ELISA对拯救病毒进行鉴定。通过PCR从阳性病料中扩增出PCV2两种基因型2b与2d的全基因组DNA,并分别克隆入pMD-19T载体,获得2个重组质粒,命名为p19T-PCV2b与p19T-PCV2d。利用Sac...
关键词：PCV2 感染性克隆 ELISA 
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