病毒拯救

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B亚型禽偏肺病毒B1分离株感染性克隆的构建与鉴定
《畜牧兽医学报》2025年第2期788-802,共15页于泽坤 姜承源 袁洪兴 周生 段笑笑 李彦 宋勤叶 
青岛市科技惠民示范专项项目(23-2-8-xdny-14-nsh)。
B亚型禽偏肺病毒(avian metapneumovrus,aMPV)可引起鸡肿头综合征,造成免疫抑制,引发严重的继发感染并导致鸡生产性能下降。建立国内aMPV分离株的反向遗传学系统对病毒研究及开发针对性疫苗具有重要意义。将病毒基因组扩增片段分别测序...
关键词:B亚型禽偏肺病毒 感染性克隆 三质粒 病毒拯救 
盖塔病毒感染性克隆及复制型表达载体的构建
《微生物与感染》2024年第5期267-279,共13页王永康 曹恒 龙钢 
上海市重大突发传染病防控关键核心技术研究(ZXS002R2-3)。
本研究利用反向遗传学的方法成功拯救了一株盖塔病毒(Getah virus, GETV)(GenBank:OM363683)。首先,将优化后的病毒序列克隆到含有T7或CMV启动子的低拷贝质粒pFK中,分别命名为T7-GETV和CMV-GETV。以T7-GETV为模板,通过体外转录(in vitro...
关键词:盖塔病毒 感染性克隆 病毒拯救 复制型表达载体 DNA疫苗 
猪圆环病毒3型反向遗传研究进展
《病毒学报》2024年第5期1202-1212,共11页邵丽娜 罗郑 徐通 张乐宜 李幽幽 徐志文 朱玲 
重庆市技术创新与应用发展专项(项目号:cstc2021jscx-dxwtBX0007),题目:SPF猪在猪用抗体诊断试剂盒研制中的开发应用;国家生猪技术创新中心先导科技项目(项目号:NCTIP-XD/C14),题目:实验猪资源开发创新团队基本建设任务;四川省“十四五”川猪重大科技专项(项目号:2021ZDZX0010-3),题目:猪重大疫病病原解析溯源及特色疫苗创制。
猪圆环病毒3型(Porcine circovirus 3,PCV3)是与猪皮炎和肾病综合征(Porcine dermatitis and nephropathy syndrome,PDNS)、生殖衰竭和多系统炎症等临床症状相关的病原体,对养猪业构成严重威胁。然而,一直以来,因PCV3分离较为困难等原因...
关键词:病毒 感染 猪圆环病毒3型 机制 反向遗传 病毒拯救 
转染RNA拯救CVB3方法的建立
《中华实验和临床病毒学杂志》2024年第4期468-473,共6页李梅 王欣玲 宋芹芹 迟苗苗 韩俊 宋娟 
国家重点研发计划(2022YFC2602202);山西省中医药管理局项目(2023ZYYA019)。
目的建立转染RNA拯救CVB3的方法,为优化CVB3的分离鉴定和体外培养提供技术参考。方法比较Qiagen 57704、Qiagen 52904和Trizol三种核酸提取试剂提取CVB3基因组RNA的效率及Lipofectamine 2000和Lipofectamine 3000两种转染试剂转染病毒RN...
关键词:柯萨奇病毒B3 病毒分离 转染 病毒拯救 
反向遗传学技术在动物RNA病毒研究中的应用进展
《中国兽医科学》2024年第7期962-967,共6页关飞虎 宋亚芬 温立佳 王丽华 李丹 张辉 张乾义 王静 
国家重点研发计划项目(2022YFD1800601-4)。
反向遗传学操作系统的出现为RNA病毒在体外研究提供了一种重要的技术方法,使在精确位置对病毒基因组进行修饰成为可能。病毒的反向遗传系统通常构建在高拷贝数或低拷贝数的质粒中,通过对基因进行改造或插入外源基因等操作实现对病毒改...
关键词:RNA病毒 反向遗传 病毒拯救 感染性克隆 
貉源阿留申病毒感染性克隆的构建及病毒拯救
《中国兽医科学》2024年第7期853-858,共6页彭倩文 赵永强 邵西群 王桂武 张傲 陈立志 章秀婷 
吉林省自然科学基金项目(20190201169JC);中国农业科学院科技创新工程项目(CAAS-ASTIP-2021-ISAPS)。
旨在建立貉源阿留申病毒(RFAV)反向遗传系统,为在全基因水平上研究阿留申病毒的致病机制以及疫苗的研制提供平台。前期通过分段克隆成功获得RFAV中间编码区序列M1、M2、M3及末端序列信息。通过无缝克隆技术将RFAV中间编码区序列M1、M2...
关键词:貉源阿留申病毒 感染性克隆 病毒拯救 反向遗传操作系统 
基于体外自连接的猪圆环病毒2型感染性克隆构建方法
《生物工程学报》2024年第7期2333-2345,共13页孙仁杰 杨永乐 王雅婷 谢荣辉 张传亮 方维焕 李肖梁 赵灵燕 
浙江省自然科学基金(LQ23C180001);国家自然科学基金(32172819);浙江省动物预防医学重点实验室开放基金(ZPKLPVM2022KFKT001);浙江省“三农九方”科技协作项目(2022SNJF060,2023SNJF059)。
本研究旨在建立一种快速构建猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)感染性克隆的方法。以临床分离的PCV2 LX株为模板,利用DNA无缝克隆技术成功构建了PCV2环状感染性克隆。同时,在基因组体外自连接的构建过程以及拯救病毒的生...
关键词:猪圆环病毒2型 感染性克隆 体外自连接 病毒拯救 
C基因沉默的小反刍兽疫病毒Nigeria 75/1株反向遗传学系统的建立
《病毒学报》2024年第3期563-573,共11页李菊 石晓玲 杨晓莉 杨东亮 毕冬琳 刘方程 张潇文 李琼毅 柏家林 
国家自然科学基金(项目号:31860696),题目:PPRV非结构蛋白C抑制RLRs介导的I型IFN信号通路的分子机理研究;兰州市人才创业创新(项目号:2020-RC85),题目:运用CRISPR/Cas9介导的基因打靶技术构建定点敲入siat7e基因的悬浮培养VERO细胞;西北民族大学中央高校基本科研业务费专项(项目号:31920230001),题目:西北民族大学服务学科建设科研平台研究能力提升专项—生物工程学科科研平台群建设项目。
为建立小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus,PPRV)反向遗传学体系,本研究以PPRV Nigeria75/1疫苗株基因组序列为基础,PCR分7个片段扩增病毒基因组,运用重叠延伸PCR(Gene splicing by overlap extension PCR,SOE-PCR)在3’...
关键词:PPRV Nigeria 75/1疫苗株 C基因 SOE-PCR 病毒拯救 反向遗传学 
基于真核CMV启动子构建猪瘟病毒感染性cDNA克隆与病毒拯救
《中国预防兽医学报》2024年第6期561-567,607,共8页关飞虎 王静 宋亚芬 温立佳 田野 蒋颖 杨承槐 张辉 张乾义 
国家重点研发计划项目(2022YFD1800600、2022YFD1800601)。
为建立猪瘟病毒(CSFV)反向遗传操作系统,本研究将CSFV石门株(SM)全基因组克隆至pBAC11载体中,并采用重叠延伸PCR方法在病毒基因组5'端和3'端分别加入CMV真核启动子序列和RzBGH序列,并将其基因组nt2809的碱基C突变为T,将原有的AfeⅠ酶切...
关键词:猪瘟病毒 CMV启动子 感染性克隆 反向遗传操作系统 
基于双质粒拯救系统的新城疫病毒LaSota株的拯救
《微生物学报》2024年第5期1567-1579,共13页宗宪春 段姝宇 朱广美 徐哲 肖萌萌 王丹 贺怀悦 王建忠 
吉林省自然科学基金(20220101314JC)。
传统新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV)的拯救系统包括一个cDNA克隆质粒和分别表达NDV的核衣壳蛋白(NP)、磷蛋白(P)、聚合酶蛋白(L)的3个辅助质粒,且必须满足4个质粒同时转染进入同一个宿主细胞才能完成病毒的组装,效率相对低下...
关键词:反向遗传学技术 新城疫病毒 病毒拯救 双质粒拯救系统 
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