SOE-PCR

作品数：32被引量：59H指数：5
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C基因沉默的小反刍兽疫病毒Nigeria 75/1株反向遗传学系统的建立
《病毒学报》2024年第3期563-573,共11页李菊 石晓玲 杨晓莉 杨东亮 毕冬琳 刘方程 张潇文 李琼毅 柏家林 
国家自然科学基金(项目号:31860696),题目:PPRV非结构蛋白C抑制RLRs介导的I型IFN信号通路的分子机理研究;兰州市人才创业创新(项目号:2020-RC85),题目:运用CRISPR/Cas9介导的基因打靶技术构建定点敲入siat7e基因的悬浮培养VERO细胞;西北民族大学中央高校基本科研业务费专项(项目号:31920230001),题目:西北民族大学服务学科建设科研平台研究能力提升专项—生物工程学科科研平台群建设项目。
为建立小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus,PPRV)反向遗传学体系,本研究以PPRV Nigeria75/1疫苗株基因组序列为基础,PCR分7个片段扩增病毒基因组,运用重叠延伸PCR(Gene splicing by overlap extension PCR,SOE-PCR)在3’...
关键词：PPRV Nigeria 75/1疫苗株 C基因 SOE-PCR 病毒拯救 反向遗传学 
羊口疮病毒B2L、F1L截短融合基因的构建及生物信息学分析被引量：1
《黑龙江畜牧兽医》2022年第21期86-92,139,140,共9页付强 梁倩 鲜思美 包涛涛 杨倩 顾庆林 郑维豪 杜鹏 青成欣 
贵州省科技支撑计划项目(黔科合支撑[2018]2264);贵州省科学技术基金项目(黔科合基础[2019]1113号)。
为了构建羊口疮病毒(Orf virus,OrfV)B2L-F1L截短融合基因,并对该基因序列进行生物信息学分析,试验采用DNAStar生物信息学软件分别对B2L、F1L基因序列进行分析,截取B2L、F1L基因序列的主要抗原区域,分别设计引物,利用重叠延伸PCR(SOE-P...
关键词：羊口疮病毒 B2L F1L SOE-PCR 生物信息学分析 
Establishment and evaluation of an overlap extension polymerase chain reaction technique for rapid and efficient detection of drug-resistance in Mycobacterium tuberculosis被引量：2
《Infectious Diseases of Poverty》2022年第2期32-41,共10页Jungang Li Jing Ouyang Jing Yuan Tongxin Li Ming Luo Jing Wang Yaokai Chen 
supported by the Joint Medical Research Project of Chongqing Science&Technology Bureau and Chongqing Health Commission(2018MSXM013)。
Background:Rapid and accurate detection of drug resistance inMycobacterium tuberculosis is critical for effective control of tuberculosis(TB).Herein,we established a novel,low cost strategy having high accuracy and sp...
关键词：SOE-PCR Mycobacterium tuberculosis DRUG-RESISTANCE SEQUENCING 
2A肽介导的甜菜色素多基因表达载体构建及原核表达分析被引量：1
《分子植物育种》2022年第4期1184-1190,共7页付瑛格 李霆格 潘庆龙 谷佳 史佑海 周扬 赵莹 王健 
国家自然科学基金项目(31760590);海南省重点研发项目(ZDYF2019041);海南省自然科学基金创新团队项目(2018CXTD331);上海市资源植物功能基因组学重点实验室开放课题(PFGR202101)共同资助。
目前,自然界中未发现同时含有花青素和甜菜色素的植物,如能将甜菜色素导入到含花青素的植物中,则可能培育出全新植物品种。本研究以红甜菜(Beta vulgaris L.var.cicla L.)为植物材料,克隆甜菜色素合成途径中BvDODA1和BvCYP76AD1两个关...
关键词：甜菜色素 2A肽 SOE-PCR 原核表达 
SOE-PCR法构建新型PHA嵌合酶研究
《辽宁大学学报（自然科学版）》2021年第3期277-282,共6页赵小慧 张卉妍 胡风庆 
辽宁省自然科学基金指导计划(20180550201);沈阳市科技创新平台建设计划(17.136.8.00);营口市企业博士双创计划。
聚羟基脂肪酸酯(Polyhydroxyalkanonate,PHA)合酶是PHA合成过程中的关键酶,其活性和底物特异性决定PHA含量和单体组成.构建嵌合酶是改变PHA单体组成的一种有效方式.利用重叠延伸PCR(gene splicing by overlap extension,SOE-PCR)法,以...
关键词：聚羟基饱和脂肪酸酯(PHA) PHA合酶 嵌合酶 
抗非洲猪瘟病毒单链抗体的构建、表达及活性鉴定被引量：3
《畜牧兽医学报》2021年第5期1328-1336,共9页王丽娟 石正旺 杨波 麻园 罗俊聪 万颖 宋锐 田宏 郑海学 
国家重点研发计划项目(2018YFC0840400)。
制备抗非洲猪瘟病毒(ASFV)猪源单链抗体(ScFv),并对其生物学活性进行鉴定,筛选出具有ASFV反应活性的猪源单链抗体(ScFv),为ASFV的诊断提供新的材料。采集ASFV感染康复猪的外周血,分离淋巴细胞,提取淋巴细胞总RNA,以此为模板通过PCR扩增...
关键词：非洲猪瘟病毒 SOE-PCR 单链抗体 诊断与防控 
绵羊肺炎支原体pcDNA3.1-TBP30-Hsp70融合表达质粒的构建及对小鼠细胞免疫应答的影响被引量：9
《中国畜牧兽医》2019年第11期3387-3395,共9页周怡 王柏林 杨美 何玲 覃岚 岳筠 张双翔 周碧君 王开功 程振涛 
国家自然科学基金项目(31660723);贵州省科技计划项目(黔科合基础[2019]1181号);贵州省研究生教育创新计划项目(GZZ2017002)
为探究绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)pcDNA3.1-TBP30-Hsp70融合表达质粒对小鼠细胞免疫应答影响,本试验构建了绵羊肺炎支原体pcDNA3.1-TBP30-Hsp70融合表达质粒。用已构建的pMD19T-P30和pMD19-Hsp70质粒为模板,采用基因...
关键词：绵羊肺炎支原体 SOE-PCR 融合质粒 细胞因子 
SOE-PCR技术在羊口疮病毒真核表达质粒构建中的应用被引量：1
《黑龙江畜牧兽医》2019年第9期95-98,共4页钱林 李婷 鲜思美 曹熠 张友 徐松平 陈元翠 张益 包细明 饶体宇 吴伯梅 
贵州省科技计划项目(黔科合支撑[2018]2264);贵州省科学技术基金项目(黔科合LH字[2014]7667);贵州省动物疫病防控与兽医公共卫生保障科技创新人才团队项目(黔科合人才团队[2015]4016号);贵州大学2017年大学生创新创业训练计划项目(贵大(省)创字2017[002]);贵州大学2016年大学生"SRT计划"项目(贵大SRT字[2016]186号)
为了构建羊口疮病毒B2L和F1L基因融合真核表达质粒pVAX1-B2L-F1L,探讨制备安全可靠羊口疮病毒核酸双基因疫苗的可行性,试验通过Primer Premier 5.0软件设计B2L和F1L融合基因2对引物,应用SOE-PCR技术将B2L和F1L连接起来,用限制性内切酶...
关键词：羊口疮病毒 基因融合 SOE-PCR F1L基因 B2L基因 真核表达质粒 
食品级重组产朊假丝酵母菌的构建及其遗传稳定性测定
《畜牧与饲料科学》2018年第12期6-12,共7页其布日 萨初拉 苏少锋 高娃 王蕴华 刘红葵 吴青海 呼和 
内蒙古农牧业创新基金项目(2016CXJJM09)
旨在构建食品级酵母工程菌株,并对其遗传稳定性进行评价。采用重叠延伸PCR(gene splicing by overlap extension PCR,SOE-PCR)方法,将实验室已构建完成的原核表达载体PGZM18中的原核基因序列删除,设计2组引物,以PGZM18原核载体序列为模...
关键词：食品级菌株 产朊假丝酵母 SOE-PCR 遗传稳定性 
猪源化抗PEDV单链抗体基因的构建及其在大肠杆菌中的表达被引量：2
《中国兽医学报》2018年第8期1467-1472,共6页刘慧敏 常琛 尹志安 朱文姣 周国丽 杨国庆 
河南省高等学校重点科研资助项目(16A180005);河南农业大学青年创新基金资助项目(30601444)
通过BL21（DE3）原核表达系统制备抗猪流行性腹泻病毒（PEDV）猪源化单链抗体scFv-Fc。提取抗PEDV杂交瘤细胞2D1的总RNA，通过反转录与SOE-PCR方法获得单链抗体scFv基因，同时提取猪脾脏组织的总RNA，RT-PCR获得猪免疫球蛋白恒定区Fc基...
关键词：猪流行性腹泻病毒 单链抗体 SOE-PCR Western BLOT 
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