斯氏艾美尔球虫肌动蛋白解聚因子在HeLa细胞中的表达  

Expression of Eimeria stiedae actin depolymerizing factor in HeLa cells

作　　者：任保彦[1] 付成福[1] 宫鹏涛[1] 韩乾忠[1] 杨举[1] 李赫[1] 张国才[1] 张西臣[1] 李建华[1] 

机构地区：[1]吉林大学畜牧兽医学院,吉林长春130062

出　　处：《中国预防兽医学报》2011年第12期936-939,共4页Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine

基　　金：国家863计划(2011AA10A215);新世纪优秀人才支持计划资助项目

摘　　要：为真核表达斯氏艾美尔球虫(Eimeria stiedae)肌动蛋白解聚因子(ADF)基因,本研究采用RT-PCR技术扩增ADF基因,构建pVAX-1-ADF真核重组质粒,并转染HeLa细胞。采用RT-PCR方法检测ADF mRNA转录水平、western blot检测ADF蛋白表达水平。琼脂糖凝胶电泳结果表明PCR扩增出一条大小为350 bp的特异性片段,与预期值相符。Western blot检测显示,转染pVAX-1-ADF的HeLa细胞在大约13 ku处出现特异性表达条带,与预期值相符。本研究构建了E.stiedae ADF基因真核表达质粒pVAX-1-ADF,并且在体外真核细胞中表达,为进一步寻找防治E.stiedae的疫苗候选基因奠定了基础。To express the actin depolymerizing factor （ADF） of Eimeria stiedae in HeLa cells, the ADF gene was amplification from the E. stiedae total RNA by RT-PCR and cloned into pVAX-1. The resultant recombinant plasmid was transfected into HeLa cells with FuGENE. The results indicated that the ADF gene of E. sticdae was expressed in HeLa cells detected by RT-PCR and western blot, which would be useful for evaluating immunogenicity of ADF gene as a DNA vaccine against E. stiedae.

关 键 词：斯氏艾美尔球虫 ADF基因 真核表达 

分 类 号：S852.72[农业科学—基础兽医学]