刚地弓形虫His-TgPP2C融合蛋白的表达与纯化  

作　　者：朱森[1] 高学娟[1] 刘小会[1] 陈妙娟[1] 刘丽杰[1] 刘朗夏[1] 

机构地区：[1]暨南大学生命与健康工程研究院,广州510632

出　　处：《广东医学》2012年第2期177-179,共3页Guangdong Medical Journal

基　　金：广东省自然科学基金资助项目(编号:9151065004000005);中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(编号:21609705;21609317)

摘　　要：目的构建His-TgPP2C重组质粒,在大肠杆菌E.coil BL21(DE3)中进行融合蛋白的表达、纯化及鉴定。方法利用PCR扩增及基因重组技术,以pcDNA3-TgPP2C为模板,扩增出全长的TgPP2C基因,将所得的PCR产物插入带有His标签的原核表达载体pBAD-His中,得到重组质粒。经XhoⅠ、HindⅢ双酶切及测序鉴定正确后,转化至大肠杆菌E.coli BL21,通过异丙基-β-硫代半乳糖苷诱导表达His-TgPP2C融合蛋白,最后经Ni-NTA柱亲和层析纯化融合蛋白以及Western blot方法鉴定纯化的融合蛋白。结果得到构建好的His-PP2C质粒及纯化的目的融合蛋白His-TgPP2C。结论成功构建pBAD-His-TgPP2C原核表达载体,表达及纯化了His-PP2C融合蛋白,为深入研究TgPP2C蛋白在刚地弓形虫疾病发生发展过程中的作用奠定基础。

关 键 词：His-PP2C 融合蛋白 表达 纯化 刚地弓形虫 

分 类 号：R373.2[医药卫生—病原生物学]