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检 索 范 例 :范例一: (K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 范例二:J=计算机应用与软件 AND (U=C++ OR U=Basic) NOT M=Visual
作 者:胡美茹[1] 董雯[1] 李译[1,2] 买三月[1] 李小光[1,2] 郭宁[1] 宋伦[1]
机构地区:[1]军事医学科学院基础医学研究所病理生理学研究室,北京100850 [2]中国药科大学新药筛选中心,南京210009
出 处:《军事医学》2012年第1期24-26,共3页Military Medical Sciences
基 金:国家自然科学基金资助项目(30871277;30970594;31171342);北京市自然科学基金资助项目(5092022;5102035);国家重点基础研究发展规划资助项目(2011CB503803)
摘 要:目的探讨紫外线(UVB)反应中TNF-α在介导VEGF诱导表达中的作用。方法采用TNF-α特异性shRNA转染小鼠成纤维细胞(MEFs)并建立稳定细胞株;RT-PCR方法验证TNF-αshRNA的有效性;荧光素酶报道分析系统检测vegf基因启动子活性;ELISA方法检测VEGF的分泌表达水平。结果本课题组构建的TNF-αshRNA能够有效抑制UVB刺激作用下TNF-α的诱导表达;同样条件下,UVB诱导vegf基因启动子活性上调趋势被TNF-αshRNA显著抑制;同时VEGF的胞外分泌表达水平明显下降。结论 UVB反应中TNF-α可间接介导VEGF的诱导表达。Objective To explore the role of TNF-α in mediating VEGF expression under UVB exposure.Methods The expression plasmid containing TNF-α short hairpin RNA(shRNA) was introduced into the mouse embryonic fibroblasts(MEFs) and then the stable transfectants were established.The efficiency of TNF-α shRNA in blocking TNF-α induction under UVB irradiation was confirmed by RT-PCR assay.The transcription of vegf under UVB irradiation was determined by the luciferase reporter assay.The secretion of VEGF induced by UVB was determined by ELISA.Results TNF-α shRNA efficiently blocked UVB-induced TNF-α transcription.Under the same condition,VEGF transcription and expression were significantly inhibited.Conclusion TNF-α induction is involved in VEGF expression in the cellular UVB response.
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