中华根瘤菌NP1腺苷酸激酶基因的克隆与功能鉴定  

Cloning and Identification of Adenylate Kinase Gene of Sinorhizobium sp. NP1

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作  者:窦鑫[1] 邱枫[2] 许玮[1] 徐汉卿[1] 许雷[1] 

机构地区:[1]中国农业科学院研究生院,北京100081 [2]中国科学院研究生院生命科学学院,北京100049

出  处:《中国生物化学与分子生物学报》2012年第2期190-196,共7页Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology

基  金:国家高技术研究发展计划资助项目(863计划;No.2006AA10C413;No.2011AA10A205;No.2011AA10A203);中国农业科学院基本科研业务费(No.0042006001;No.0042009001)~~

摘  要:以中华根瘤菌NP1(Sinorhizobium sp.NP1)为原始菌株,通过同源克隆的方法,获得了579bp的腺苷酸激酶基因(adk)全长序列.该基因编码192个氨基酸,其二级结构和三级结构与Sinorhizobium meliloti 1021 ADK的二级结构和三级结构相似.以表达载体pET21b为原始载体,构建成NP1 adk原核表达载体pET21b-adk,转化E.coli BL21菌株,SDS-PAGE检测表明:adk基因获得高效表达.HPLC测定证实:重组表达菌中ATP含量约为对照的1.3倍.上述结果证明本实验中所克隆的腺苷酸激酶基因具增强ATP合成的功能.

关 键 词:腺苷酸激酶 基因克隆 原核表达 高效液相色谱 

分 类 号:Q812[生物学—生物工程]

 

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