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作 者:钱莘[1] 丁金勇[2] 敖绪军[2] 安江洪[2] 陈正堂[2]
机构地区:[1]武警广东省总队医院肿瘤中心,广东广州510507 [2]第三军医大学附属新桥医院全军肿瘤中心,重庆400037
出 处:《肿瘤学杂志》2011年第9期657-661,共5页Journal of Chinese Oncology
基 金:国家自然科学基金(30672076);国家重点基础研究发展"863"计划资助项目(2007AA02Z129)
摘 要:[目的]检测并验证正常成年小鼠肺内支气管肺泡干细胞(BASCs)的miRNAs表达情况。[方法]流式细胞仪分选小鼠BASCs和其对照细胞(CD45-CD31-Sca-1-CD34-细胞);将分选出的细胞常规提取RNA后,经YM-100(Millipore)微离心过滤柱抽提小于300核苷酸长度的小RNA;微阵列法检测BASCs和其对照细胞的miRNAs表达谱,筛选出差异miRNAs;构建miRNAs特异性TaqManMGB探针,qRT-PCR法验证所选差异miRNAs在两种细胞的表达。[结果]微阵列法检测显示BASCs和对照细胞有116个miRNAs的表达有显著性差异(P<0.01),其中有56个miRNAs在BASCs高表达,60个miRNAs在BASCs低表达。在这些差异miRNAs中选取了10个与细胞周期、干细胞分化、肿瘤发生相关的miRNAs,通过qRT-PCR法检测其在BASCs和对照细胞中的表达,qRT-PCR的检测结果与miRNAs芯片检测结果一致。[结论]研究通过微阵列法鉴定了小鼠BASCs的miRNAs表达谱,与对照细胞相比,发现116个miRNAs的表达具有显著性差异(56个高表达,60个低表达)。
关 键 词:干细胞 微小RNA 微阵列 实时定量聚合酶链反应 肺肿瘤
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