色素上皮衍生因子对高糖环境下视网膜Muller细胞钾离子通道Kir4．1的调控  

The regulation of Kir4. 1 by pigment epithelium-derived factor in Miiller cells under high glucose conditions

作　　者：沈玺[1] 王亚娜[1] 

机构地区：[1]上海交通大学医学院附属瑞金医院眼科,200025

出　　处：《中华眼底病杂志》2012年第3期268-271,共4页Chinese Journal of Ocular Fundus Diseases

基　　金：国家自然科学基金（81170860）;上海市科委自然科学基金（11ZR1422000）;上海市教委自然科学基金（10YZ38）

摘　　要：目的探讨高糖环境下视网膜Mailer细胞钾离子通道Kir4．1的表达改变及色素上皮衍生因子（PEDF）对Kir4．1的调控及可能机制。方法培养的大鼠Mailer细胞随机分为对照组、高糖组、PEDF干预组和干预对照组。其中，对照组使用5mmol／L葡萄糖的培养液，高糖组使用25mmol／L葡萄糖的培养液，PEDF干预组在25mmol／L葡萄糖的培养液中加入100ng／mlPEDF，干预对照组在25mmol／L葡萄糖的培养液中只加入相同容积的磷酸缓冲盐溶液。通过蛋白免疫印迹法和实时荧光逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法检测各组Maller细胞Kir4．1表达的改变，同时采用二氯二氢荧光素二已酯荧光法检测各组细胞中氧自由基（ROS）生成；实时荧光RT—PCR法检测脂质过氧化物酶（GPx）的表达变化。结果蛋白免疫印迹法和实时荧光RT—PCR法检测结果提示，高糖可以降低视网膜Maller细胞Kir4．1的表达（蛋白免疫印迹法：t=3．53，P〈0．05；实时荧光RT—PCR法：t=4．12，P〈O．05），同时引起ROS生成增多（t=3．76，P〈0．05）以及GPx表达下降（t=3．18，P〈0．05）。PEDF处理后，高糖状态下视网膜Maller细胞的Kir4．1表达显著上升（蛋白免疫印迹法：t=6．43，P〈0．01；实时荧光RT—PCR法：t=3．66，P〈0．05），同时使ROS浓度下降及GPx表达升高（t=4．11，P〈0．05；t=5．12，P〈0．01）。结论高糖可以通过诱发氧化应激从而使Mailer细胞Kir4．1的表达下调，PEDF能改善由高糖诱发的这一变化。Objective To investigate Kir4.1 expressions in Mtiller cells under high glucose conditions and treatment of pigment epithelium-derived factor （PEDF）. Methods Cultured rat Muller cells were divided into control group （5 mmol/L glucose）, high glucose group （25 mmol/L glucose）, PEDF treatment group （25 mmol/L glucose＋100 ng/ml PEDF） and intervention control group（25 mmol/L glucose ＋ phosphate buffer solution）. Kir4. 1 expressions were measured by Western blot and real-time reverse transcription polymerase chain reaction （RT-PCR）. Reactive oxygen species （ROS） productions were measured using 2 7 -dlchlorofluorescln diacetate and glutathione peroxidase （GPx）expressions were studied by real-time RT-PCR. Results By Western blot and real-time RT-PCR, it was found the expressions of Kir4. 1 decreased obviously under high glucose conditions （real-time RT-PCR： t=4. 12, P〈0.05; Western blot： t=3.53, P〈0.05）; simultaneously, ROS generation was increased （t=3.76, P〈0.05） and GPx level was decreased （t=3.18, P〈0.05）. PEDF treatment inhibited the high glucose-induced Kir4.1 down regulation （real-time RT-PCR t=3.66, P〈0.05; Western blot： t=6.43, P〈0.01） and decreased ROS generations （t=4.11, P〈0.05） and increased GPx levels （t=5.12, P〈0.01）. Conclusions The high glucose can supress Kir4.1 expressions in Muller cells by oxidative stress, and PEDF can ameliorate these effects.

关 键 词：糖尿病视网膜病变/病理生理学 细胞因子类/生理学 MULLER细胞 钾通道/生理学 

分 类 号：R774.1[医药卫生—眼科]