沙棘SRAP-PCR反应体系的优化及引物筛选  

Optimization of the SRAP-PCR System for Sea Buckthorn(Hippophae rhamnoides) and Primers Screening

作　　者：赵春娥[1,2] 鲍荟宇[2] 李贺[2] 

机构地区：[1]辽宁师范大学生命科学学院,辽宁大连116029 [2]大连民族学院环境与资源学院,辽宁大连116600

出　　处：《湖北农业科学》2012年第8期1691-1695,共5页Hubei Agricultural Sciences

基　　金：国家自然科学基金项目(31100489)

摘　　要：为建立适合沙棘(Hippophae rhamnoides L.)的SRAP-PCR反应体系,对影响SRAP-PCR的Mg2+浓度、Taq DNA聚合酶浓度、引物浓度、dNTPs浓度、模板DNA浓度进行了优化。优化后的反应体系为Mg2+3.0 mmol/L、Taq DNA聚合酶2U/25μL、引物0.8μmol/L、dNTPs 0.25 mmol/L、模板DNA 30 ng/25μL,反应总体系25μL。利用此体系从30对引物组合中筛选出17对适合沙棘SRAP-PCR的引物,有助于沙棘的分子标记辅助育种研究。The concentrations of Mg2＋,Taq DNA polymerase,primers,dNTPs,template DNA affecting the SRAP-PCR reaction were optimized to establish the SRAP-PCR system for sea buckthorn（Hippophae rhamnoides L.）.The optimum 25 μL reaction system contained 3.0 mmol/L Mg2＋,2 U/25 μL Taq DNA polymerase,0.8 μmol/L primers,0.25 mmol/L dNTPs and 30 ng/25 μL DNA templates.17 out of 30 primer pair combinations were screened out using the optimized amplification system,which would support the molecular marker assisted breeding of sea buckthorn.

关 键 词：沙棘(Hippophae rhamnoides L.) SRAP-PCR 优化 引物筛选 

分 类 号：S793.6[农业科学—林木遗传育种] Q943.2[农业科学—林学]