表达FLP重组酶pCEP4-FLP载体的构建及其在FLP/FRT重组系统中的应用  

Construction of FLP Recombinase Expression Vector pCEP4-FLP and Its Application in FLP/FRT System

作　　者：肖雪宾[1] 袁婷[1] 纪元[1] 宋奇[1] 韩晓蕾[1] 武蓉[1] 林晓晨[1] 欧阳红生[1] 李莉[1] 

机构地区：[1]吉林大学 畜牧兽医学院 动物胚胎工程吉林省重点实验室,吉林长春130062

出　　处：《河北师范大学学报（自然科学版）》2012年第3期291-296,共6页Journal of Hebei Normal University：Natural Science

基　　金：国家973项目(2011cba01003)

摘　　要：构建重组载体pCEP4-FLP和pEF1a-FRT-stop-FRT-GFP,重组载体pEF1a-FRT-stop-FRT-GFP瞬时转染PK-15细胞24h后,再将重组载体pCEP4-FLP瞬时转染该细胞,利用荧光显微镜观察PK-15细胞GFP蛋白的表达情况,利用细胞流式技术统计绿色荧光蛋白表达效率.结果表明:重组载体pCEP4-FLP在细胞内能够表达FLP重组酶,并且表达的FLP重组酶能够识别FRT位点,删除两同向FRT位点间的DNA片段,为FLP/FRT位点特异性重组系统在转基因猪的应用奠定了基础.The recombinant vectors pCEP4-FLP and pEF1a-FRT-stop-FRT-GFP were transfected by pCEP4-FLP.The expression of EGFP were analyzed by fluorescence microscope.FACS analysis of the induction of EGFP expression.The recombinant vector pCEP4-FLP can express FLP recombinase which can recognize FRT sites and delete the DNA fra-1gment between two FRT sites in the same orientation.This system will be of great value for the applications of transgenic pigs.

关 键 词：FLP/FRT系统 位点特异性重组 PK-15细胞系 

分 类 号：Q291[生物学—细胞生物学]