志贺菌rfbA基因突变体的构建  

作　　者：宋丽[1,2] 牛畅[2] 白国旺[2] 冯尔玲[2] 刘先凯[2] 魏华[1] 王恒樑[2] 熊勇华[1] 朱力[2] 

机构地区：[1]南昌大学中德联合研究院,南昌330047 [2]军事医学科学院生物工程研究所,病原微生物生物安全国家重点实验室,北京100071

出　　处：《军事医学》2012年第5期399-400,F0003,共3页Military Medical Sciences

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81071324,81171531);国家973计划资助项目(2011CB504901)

摘　　要：目的构建弗氏2a志贺菌301 rfbA基因缺失突变株,初步探究志贺菌脂多糖合成与糖蛋白合成通路是否相关。方法首先用PCR扩增出rfbA基因上下游同源臂,构建含有kan基因的打靶片段,采用λ-Red重组系统对rfbA基因进行缺失,用PCR进行初步验证,然后通过LPS的银染方法进行进一步验证。随后,制备野生株、rfbA缺失突变株的全菌蛋白样品,进行双向电泳后比较野生株301和rfbA缺失株的蛋白表达谱。结果成功构建了301 rfbA缺失突变株。在LPS的银染实验中,rfbA突变株在凝胶中未形成一长串的梯状条带。在双向电泳实验中,野生株和突变株没有明显的蛋白差异点。结论获得了301 rfbA基因缺失突变体,初步认为志贺菌中不存在与脂多糖O-抗原合成相关的蛋白糖基化途径。

关 键 词：志贺菌属 志贺菌 弗氏 脂多糖类 基因缺失 突变 

分 类 号：R378.25[医药卫生—病原生物学]