微孔比浊法测定牛黄上清片的抗菌效价  

作　　者：张恩户[1] 乔慧[1] 王光建[1] 王国全[1] 赵子剑[2] 

机构地区：[1]陕西中医学院药理教研室,咸阳712046 [2]怀化学院民族药用植物资源研究,怀化418008

出　　处：《中药药理与临床》2012年第3期23-25,共3页Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica

基　　金：陕西省中医管理局科研课题-基于生物检定法的黄连;黄连上清丸质量标准的研究(编号2007-11)资助

摘　　要：目的:建立牛黄上清片抗菌效价的微孔比浊法。方法:采用L9(34)正交表制备牛黄上清片供试品溶液,采用二倍微孔等倍稀释法,测定各供试品溶液对6种标准菌株的MIC和MBC,确定供试品溶液的制备方法和试验菌株;考察二倍微孔等倍稀释法中培养基pH、板位等因素对抗菌结果(OD值)的影响;按照《中国药典》2010年版(二部)抗生素微生物检定法的比浊法原理,确定黄芩苷+栀子苷(5:2)为参照药物,以0.035g/ml(规定为1000 U/ml)为中心浓度,按剂距0.8配制终浓度,以二倍微孔等倍稀释法测定各溶液的OD差值,绘制黄芩苷+栀子苷(5:2)的量-效标准曲线,计算方程式;进行稳定性、重复性和平均回收率试验;对3各厂家的牛黄上清片进行效价测定,确定效价限度。结果 :牛黄上清片水煎醇沉法1.6号供试品溶液(10倍量水煎1.5小时,醇沉浓度为50%)对金黄色葡萄球菌的抗菌作用最强。培养基pH和板位对OD值的影响不大,选用pH7.0为培养基pH;黄芩苷+栀子苷(5:2)的中间浓度为0.035g/ml,其浓度在0.016～0.08g/ml范围内,光密度和溶液浓度对数呈较好的线性关系,标准曲线回归方程为y=-0.3291X-0.3978,r2=0.9738。误差项S2=0.0612,标准误差Sm=0.078,R的平均β的可信限率FL%=11.34%;供试品在5h内稳定性良好,RSD(%)为5.14;供试品重复性良好,RSD(%)为8.68;平均回收率为100.41%,RSD=1.9;由黄芩苷+栀子苷标准曲线方程计算得出,三个厂家的牛黄上清片效价分别为1431.03U/g、1396.55U/g、1448.28U/g。结论:牛黄上清片供试品的制备方法为:取牛黄上清片20片,去除糖衣,用乳钵碾成细粉。精密称取本品10g,加水200ml煎煮1.5h,过滤,滤液加乙醇使含醇浓度50%,沉淀过夜,过滤,滤液浓缩,用灭菌PBS液定容至10ml,即得。使用前用0.22μm微孔滤膜过滤。参照药物溶液的制备方法为:精密称取黄芩苷3.5714g和栀子苷1.4286g混匀,置于10ml的容量瓶中,加适量的无菌PBS溶解完全,稀释�

关 键 词：牛黄上清片抗生素微生物检定法微孔比浊法 

分 类 号：R285[医药卫生—中药学]