盘鲍原肌球蛋白基因的克隆、表达及其免疫原性鉴定  

作　　者：龚礼财[1,2] 邬玉兰[1] 李小龙[1] 魏鹏飞[1] 李荔[2] 刘志刚[1] 

机构地区：[1]深圳大学医学院,广东深圳518000 [2]深圳大学生命科学学院,广东深圳518000

出　　处：《水产科技情报》2012年第4期163-167,共5页Fisheries Science & Technology Information

基　　金：国家863计划(No.2006AA100308);深圳市深港创新圈项目(No.CX Q2008026);深圳大学校创新科研团队基金(No.200904)

摘　　要：为获得具有过敏原活性的重组盘鲍TM进行了试验。克隆盘鲍原肌球蛋白(tropomyosin,TM)基因并表达纯化出重组蛋白,对其免疫学特性进行了鉴定。从盘鲍肌肉中提取总RNA,RT-PCR克隆盘鲍中原肌球蛋白基因,根据序列设计带有酶切位点的特异性引物,扩增盘鲍TM的开放阅读框,与pET-28a载体连接并转化入大肠杆菌Escherichia.coli BL21(DE3),诱导表达后,Ni2+亲和层析柱纯化重组蛋白,West-ern-blot检测其免疫学活性。经序列测定,该基因由855个碱基组成,编码284个氨基酸。SDS-PAGE检测该重组蛋白在大肠杆菌中高效表达38 kD的目的蛋白,且重组蛋白具有良好的IgE结合活性。

关 键 词：盘鲍 过敏原 原肌球蛋白 克隆 表达 

分 类 号：S917.4[农业科学—水产科学]