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作 者:崔飞伦[1,2] 邱镇[1] 胡建鹏[1] 范钰[2]
机构地区:[1]江苏大学附属人民医院泌尿外科,江苏镇江212002 [2]江苏大学附属人民医院肿瘤研究所,江苏镇江212002
出 处:《江苏大学学报(医学版)》2012年第4期324-327,共4页Journal of Jiangsu University:Medicine Edition
基 金:镇江市科技计划项目(SH2008035)
摘 要:目的:观察RNA干扰沉默MTA1基因对膀胱癌细胞株BIU-87增殖和失巢凋亡的影响。方法:构建针对MTA1基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),应用MTA1 siRNA转染处理人膀胱癌细胞株BIU-87后,分别采用实时定量PCR和蛋白质印迹法检测MTA1基因mRNA和蛋白的表达,采用软琼脂集落培养试验检测锚着不依赖性增殖,琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术检测BIU-87细胞失巢凋亡。结果:与对照组比较,MTA1 siRNA转染组MTA1 mRNA和蛋白水平明显下降,且呈浓度依赖性(P<0.01)。MTA1 siRNA转染组软琼脂集落形成数明显减少,且与浓度相关(P<0.01)。琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术结果显示,MTA1 siRNA转染可诱导BIU-87细胞失巢凋亡,且与浓度相关(P<0.01)。结论:MTA1 siRNA可抑制膀胱癌细胞株BIU-87增殖,诱导失巢凋亡可能是其机制之一。Objective: To observe the effects of MTA1 small interfering RNA(siRNA)on anchorage-independent growth and anoikis of bladder cancer cell line BIU-87.Methods: After construction of the MTA1 gene eukaryotic expression vector of siRNA and transfected to the bladder cancer cell line BIU-87,the expression of MTA1 gene was detected by real-time PCR and western blot;to detect anchorage-independent growth using clon formation in soft agar,and anoikis using DNA fragmentation assay and flow cytometry assay,respectively.Results: The level of mRNA and protein of MTA1 of groups transfectd with siRNA were decreased markedly in a time-and dose-dependent manner.MTA1 siRNA can inhibit anchorage-independent growth in a dose-dependent manner.MTA1 can reduced the resistance to anoikis of BIU-87 cells in a dose-and time-dependent manner.Conclusion: MTA1 siRNA can inhibit the growth of bladder cancer cell line BIU-87 through inducing anoikis.
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