内源性PS1在活体HEK293和HeLa细胞膜上的定位  

Expression and Location of endogenous PS1 gene in cytoplamic membrane of live HEK29 and HeLa cells

作　　者：宁丽峰[1] 王慧萍[1] 李铁[2] 桑建利[2] 李佳慧[3] 

机构地区：[1]国家人口计生委科学技术研究所生殖免疫研究室,北京100081 [2]北京师范大学生命科学院细胞生物学研究所,北京100875 [3]中国医学科学院中国协和医科大学实验动物研究所,北京100021

出　　处：《基础医学与临床》2012年第12期1400-1405,共6页Basic and Clinical Medicine

基　　金：科学技术部"科技基础工作项目"(G99-E-01)

摘　　要：目的检测内源性PS1在活体细胞膜上的定位及其表达。方法为防止细胞固定及通透使胞膜被破坏,在未经固定和通透的活体细胞上利用PS1抗体,通过间接免疫荧光法观察了内源性PS1在活细胞膜外表面的定位和表达;利用分子标签技术,构建GFP-PS1融合蛋白,瞬时转染细胞,检测到外源性PS1在细胞核膜的定位及在胞质中的少量分布;同时利用PS1抗体,将细胞固定及通透,用间接免疫荧光技术,检测到内源性PS1在细胞核膜中的定位及在细胞质中的少量不均匀分布。结果内源性PS1在定位于亚细胞结构的膜同时,也定位于细胞外膜。结论成功地在活体细胞外膜上检测到内源性PS1。Objective To detect the membrane location of endogenous PS1 on live cells.Methods HEK293 and HeLa cells were transfected with fusion proteins by attaching GFP-PS1.The cellular location of endogenous and exogenous PS1was characterized with antibody by indirect immunofluorescence technique.Results Endogenous and exogenous PS1 was found on the nuclear membrane and a little and inhomogeneous distribution in cytoplasm.Conclusions Endogenous PS1 located on the outer membrane of the unfixed and live cells.

关 键 词：早老素1基因 绿色荧光蛋白(GFP) 活体细胞 定位 

分 类 号：R749.16[医药卫生—神经病学与精神病学]