副结核分枝杆菌MAP1588C蛋白的原核表达与抗原性分析  

PROKARYOTIC EXPRESSION AND ANTIGENICITY ANALYSIS OF MAP1588C OF MYCOBACTERIUM PARATUBERCULOSIS

作　　者：刘银冰[1,2] 陈利苹[2] 鄢秋龙[1,2] 曹俊[2] 刘思国[2] 

机构地区：[1]黑龙江八一农垦大学动物科技学院,大庆163319 [2]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室,哈尔滨150001

出　　处：《中国动物传染病学报》2012年第6期36-39,共4页Chinese Journal of Animal Infectious Diseases

基　　金：国家重点基础研究发展973计划(2012CB518801);兽医生物技术国家重点实验室基本科研业务费项目(SKLVBP2012)

摘　　要：从副结核分支杆菌K-10菌株基因组中扩增出516 bp的MAP1588C基因片段,插入原核表达载体pET-28b(+),转化至大肠杆菌BL21(DE3),在0.5 mmol/L的IPTG诱导下进行表达;利用融合蛋白的组氨酸标签进行亲和层析纯化重组蛋白;通过抗6 His标签抗体的Western blot验证了纯化蛋白产物;另外,副结核阳性牛血清可检测到该蛋白条带。结果表明,表达的重组蛋白MAP1588C的蛋白分子量为21 kDa,具有良好抗原性,有望将此抗原用于建立副结核的ELISA诊断方法。The gene of MAP1588C was cloned from Mycobacterium paratuberculosis（MAP） strain K-10 and inserted into pET-28b（＋） vector.The resulting recombinant plasmid p28B-MAP8 was transformed into E.coli BL21（DE3）.Then,the product expressed was purified using Ni2＋ affinity chromatography.The purified MAP1588C was approximately 21 kDa and reacted with anti-6His antibody and MAP cattle antiserum in Western blotting.These results indicated that the recombinant MAP1588C maintained good reactivity and could be used for development of an ELISA method for diagnosis of MAP.

关 键 词：副结核分支杆菌 MAP1588C蛋白 重组表达 免疫性 

分 类 号：S852.618[农业科学—基础兽医学]