宿半夏SRAP-PCR反应体系优化的研究  

Study on optimization of SRAP-PCR reaction System for Pinellia ternata in Suzhou

作　　者：张爱民[1] 卢河东[1] 薛建平[1] 陶兴魁[1,2] 薛涛[1] 盛玮[1] 朱艳芳[1] 

机构地区：[1]淮北师范大学生命科学学院资源植物生物学安徽省重点实验室,安徽淮北235000 [2]宿州学院化学与生命科学学院,安徽宿州234000

出　　处：《中国中药杂志》2012年第24期3815-3818,共4页China Journal of Chinese Materia Medica

基　　金：国家自然科学基金项目(30973963);安徽省自然科学基金项目(090413252);安徽高校省级自然科学研究重点项目(KJ2009A160);宿州学院特色种植业苗种生产工程技术研究中心项目(2011YKF18)

摘　　要：目的:研究宿半夏SRAP-PCR分子标记技术的优化体系。方法:采用L16(54)正交设计对宿半夏SRAP-PCR反应体系进行了5因素(dNTPs,Mg2+,模板DNA,引物,Taq酶)4水平优化筛选。结果:半夏SRAP最适合的正向引物是5'-TGAGTCCAAACCGGAAG-3',反向引物为5'-GACTGCGTACGAATTACG-3'。优化的反应体系为25μL反应体系中含有70 ngDNA模板,0.9μmol.L-1引物,0.2 mmoL.L-1dNTPs,1.5～2.0 mmol.L-1Mg2+,2.0 U Taq酶。结论:宿半夏SRAP-PCR体系的建立为今后构建半夏SRAP遗传图谱奠定了基础。Objective： To investigate the optimization system of SRAP-PCR molecular marker technology in the analysis on Pinellia ternata. Method ： SRAP-PCR reaction system for P. ternata was optimized by L16 （5^4 ） orthogonal design with five elements （ dNTPs, Mg^2 ＋ , the template DNA, primers, Taq enzyme） and four standards. Result ： The most suitable forward primer for SRAP for Pinellia ternata was 5＇-TGAGTCCAAACCGGAAG-3＇, while the reverse primer was 5＇-GACTGCGTACGAATFACG-3＇. The optimized reaction system contained 70 ng DNA template, 0. 9 μmol ·L^-1 primer, 0. 20 mmol·L^-1 dNTP s, 1.5 - 2. 0 mmol ·L^-1 Mg2 ＋ , and 2 U Taq enzyme. Conclusion ： SRAP-PCR system for P. ternata is established to lay a foundation for future construction of SRAP genetic map of P. ternata.

关 键 词：半夏 SRAP-PCR 反应体系优化 正交设计 

分 类 号：R282[医药卫生—中药学]