奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌和大肠杆菌二重PCR检测方法的建立  

作　　者：聂培[1] 易驰喆[1] 贺婷[1] 陈亚明[1] 刘平[1] 侯小露[1] 杜玉兰[1] 何宝祥[1] 

机构地区：[1]广西大学兽医内科学实验室,南宁530005

出　　处：《广西畜牧兽医》2013年第1期11-15,共5页Guangxi Journal of Animal Husbandry & Veterinary Medicine

基　　金：国家自然科学基金(批准号:30960294);广西科技攻关(桂科攻10100014-3);广西教改项目(编号GXTSZY141);广西大学大学生创新(SYJN20121714)

摘　　要：金黄色葡萄球菌和大肠杆菌是引起奶牛乳房炎的主要病原菌。选取金黄色葡萄球菌的Nuc基因和大肠杆菌16S-23SrRNA基因作为扩增靶基因序列,设计两对特异性引物。通过正交试验优化反应条件建立二重PCR检测体系,优化结果表明二重PCR扩增出两条特异性条带,大小与实验设计的249bp(金黄色葡萄球菌)和375bp(大肠杆菌)相符,而对其它奶牛乳房炎主要病原菌的PCR扩增结果均为阴性;敏感性测定结果表明,该二重PCR技术能同时检出14.6pg的金黄色葡萄球菌模板和26.0pg的大肠杆菌模板。使用该二重PCR检测29份临床奶样,发现其中17份携带相关基因,并分离得到相关致病菌。

关 键 词：二重PCR 金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 

分 类 号：S858.237.26[农业科学—临床兽医学]