纳豆激酶的克隆及在大肠杆菌中的表达  

Cloning and Expression of Nattokinase Gene in Escherichia coli

作　　者：李敏[1] 陈柳萌[2] 张诚[2] 曾小军[3] 刘芬 陈时建[1] 李文婧[1] 罗武[1] 

机构地区：[1]南昌大学科学技术学院,江西南昌330046 [2]江西省农业科学院农业微生物研究所,江西南昌330200 [3]江西省农业科学院农业信息研究所,江西南昌330200 [4]江西省南昌县农业技术推广中心土肥站,江西南昌330200

出　　处：《江西农业学报》2012年第12期144-146,共3页Acta Agriculturae Jiangxi

基　　金：江西省科技计划项目"纳豆激酶蛋白在酿酒酵母中的表达及应用"(20112BBF60009)

摘　　要：该文采用PCR方法扩增获得了纳豆激酶基因(pro-NK),通过酶切与酶连反应使其与原核表达载体Pet32a相连,构建重组质粒Pet32a-pro-NK,先转入到大肠杆菌DH5α中进行筛选与验证,再将阳性克隆子转化到宿主菌BL21(DE3)中,在IPTG诱导下进行纳豆激酶蛋白的表达研究。SDS-PAGE电泳分析结果表明,纳豆激酶蛋白在BL21(DE3)中获得高效表达。The nattokinase gene pro-NK was cloned by PCR technique.The expression plasmid of Pet32a-pro-NK was constructed based on enzyme digestion and enzyme-linked reaction.The confirmed positive clones were further transformed into Escherichia coli strain BL21（DE3） to study the expression of nattokinase with IPTG induction.The result of SDS-PAGE electrophoretic analysis manifested that nattokinase protein could express efficiently in BL21（DE3）.

关 键 词：纳豆激酶基因 克隆 表达 大肠杆菌 

分 类 号：Q785[生物学—分子生物学] Q786