转化生长因子β1对羊膜细胞中基质金属蛋白酶9及其组织抑制物1表达的影响  

Effect of transforming growth factor Ill on the expression of matrix metalloproteinase 9, tissue inhibitor of metalloproteinase 1 and nuclear factor kappa B signalling pathway in the human amniotic cells WISH

作　　者：范明松[1] 姜子燕[1] 邹艳芬[1] 瞿琳[1] 周雪[1] 孙丽洲[1] 

机构地区：[1]南京医科大学第一附属医院妇产科,210029

出　　处：《中华妇产科杂志》2013年第1期29-33,共5页Chinese Journal of Obstetrics and Gynecology

基　　金：国家自然科学基金（81070511）;江苏省自然科学基金（21010583）

摘　　要：目的探讨转化生长因子β1（TGF-β1）对羊膜vc3sr]细胞中基质金属蛋白酶9（MMP-9）及其组织抑制物1（TIMP-1）和核因子KB（NF．KB）表达的影响及其调控机制。方法在羊膜细胞系WISH细胞中分别加入不同浓度（0、2、10、20rig／m1）的TGF-β1，培养24h后，分别应用逆转录（RT）PCR技术检测WISH细胞中TIMP．1及MMP-9mRNA的表达水平，蛋白印迹法检测TIMP-1、MMP-9及NF．KB蛋白的表达。结果（1）TIMP．1mRNA及蛋白表达：经不同浓度TGF-β1（0、2、10、20rig／m1）处理后，WISH细胞中TIMP-1mRNA的表达水平随TGF-131浓度的增加而升高，分别为0．413±0．036、0．623±0．058、1．392±0．124及1．387±0．102，其中2、10及20rig／nil浓度时TIMP-1mRNA表达水平分别与0rig／ml浓度比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；WISH细胞中TIMP-1蛋白表达水平随TGF-β1浓度的增加而升高，分别为0．357±0．031、0．596±0．048、1．243±0．097及1．359±0．121，2、10及20rig／ml浓度的TGF-β处理后，WISH细胞中TIMP-1蛋白表达水平分别与0ng／ml浓度时比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。（2）MMP-9mRNA及蛋白表达：经不同浓度的TGF-β1（0、2、10、20ng／m1）处理后，WISH细胞中MMP-9mRNA表达水平随TGF-131浓度的增加而降低，分别为1．325±0．056、0．987±0．081、0．610±0．034及0．347±0．023，其中2、10及20rig／ml浓度时MMP-9mRNA表达水平分别与0rig／ml浓度时比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；WISH细胞中MMP-9蛋白表达水平随TGF．t31浓度的增加而降低，分别为1．119±0．064、1．008±0．052、0．578±0．041及0．401±0．015，2、10及20rig／ml浓度时MMP-9蛋白的表达水平分别与0rig／ml浓度时比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。（3）NF-KB蛋白表达：经2、10、20ng／ml浓度时TGF-β1处理后，WISH细胞中NF-KB蛋白的表达水平分别为1．116±0．045、0．796±0．041及0．35Objective To investigate the effect of transforming growth factor -β （TGF--β） on the expression of matrix metalloproteinase 9 （MMP-9）, tissue inhibitor of metalloproteinase 1 （TIMP-1）, nuclearfactor kappa B（NF-KB） and the possible signalling pathways in human amniotic cells WISH. Methods The WISH cell line was cultured. WISH cells were added with TGF-[M of different concentrations （0, 2, 10 and 20 ng/ml, respectively） for 24 hours. Then, reverse transcription （RT）PCR and western blotting were used to analyze the protein and mRNA expression of TIMP-1 and MMP-9; and the expression of NF-KB was analyzed by western blot. Results （ 1 ） The profile of TIMP-1 mRNA （ 0. 413 ± 0. 036, 0. 623 ± 0. 058, 1. 392 ±0. 124, 1. 387±0. 102） in WISH cells elevated when the concentration of TGF-131 increased （0, 2, 10, 20 ng/ml）. In accordance with TIMP-1 mRNA, the expression of TIMP-1 also elevated with the increase of TGF-β1 （0. 357 ± 0. 031, 0. 596 ± 0. 048, 1. 243 ± 0. 097 and 1. 359 ± 0. 121, respectively）. And when 2, 10 or 20 ng/ml of TGF-[31 was added, the TIMP-1 mRNA and protein were significantly higher than the TIMP-1 mRNA and protein when no TGF-IM was added（P 〈 0.05 ）. （2）In contrast with TIMP-1, MMP-9 mRNA （ 1. 325 ± 0. 056, 0. 987 ± 0. 081,0. 610 ± 0. 034, 0. 347 ± 0. 023 ） in WISH cells decreased when the concentration of TGF-β1 increased （0, 2, 10, 20 ng/ml）. The MMP-9 protein （ 1.119 ±0. 064, 1. 008 ±0. 052, 0. 578 -±0. 041, 0. 401 -±0. 015） also decreased with the increase of TGF-β1. And when 2, 10 or 20 ng/ml of TGF-β1 was added, the MMP-9 mRNA and protein were significantly lower than the MMP-9 mRNA and protein when no TGF-β1 was added （ P 〈 0. 05 ）. （ 3 ） The NF-KB protein （ 1. 423 ± 0. 065, 1. 116 ± 0. 045, 0. 796 ± 0. 041, 0. 359 ± 0. 021 ） was significantly reduced with the increase of TGF-β1 （0, 2, 10, 20 ng/ml;P 〈 0.05）. Conclusions The mRNA and protein expression of TIMP-1 decreased when TGF-IM wa

关 键 词：胎膜早破 金属蛋白酶1组织抑制剂 基质金属蛋白酶9 NF-KB 转化生长 因子-β 羊膜 

分 类 号：R285.5[医药卫生—中药学]